WWW.NAUKA.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Книги, издания, публикации
 

«БИОФИЗИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ КРИСТАЛЛОГРАФИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ И.А.Мальчиков, И.А.Тузанкина, Ю.В.Григорьева, Л.П.Мальчикова ФГУН Екатеринбургский НИИ вирусных ...»

WWW.MEDLINE.RU ТОМ 7, ВИРУСОЛОГИЯ, ДЕКАБРЬ 2006

Дата поступления: 11.10.2006.

БИОФИЗИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ КРИСТАЛЛОГРАФИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ

ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

И.А.Мальчиков, И.А.Тузанкина, Ю.В.Григорьева, Л.П.Мальчикова

ФГУН Екатеринбургский НИИ вирусных инфекций, Институт иммунологии и физиологии УрО

РАН, Уральская государственная медицинская академия, г. Екатеринбург.



В биологии и медицине используют 3 разновидности кристаллографического метода исследования: поляризационный, тезиграфический метод с применением гидрата хлорида меди (CuCl2 х 2Н2О) и выветривание кристаллических налетов солей NaCl. Образующийся при их использовании текстурный рисунок липотропных биологических жидкостей зависит от состояния организма [4]. Малейшие нарушения, связанные с болезнью? приводят к изменению химического состава биологических жидкостей. Но теоретический анализ крайне затруднен сложностью явления, что требует привлечения наиболее общих математических подходов [7].

Современные лабораторные методы позволяют анализировать лишь основные характеристики устойчивых структур организма. Биохимические, физико-химические, иммунологические методы исследования могут дать фрагментарные сведения о состоянии организма, что оправдывает себя только на первых этапах постановки клинического диагноза. Однако, дать ключ к высокодинамичным связям самих биологических жидкостей с состоянием органов и систем указанные выше методы не могут, хотя способы обнаружения этих связей существуют например, путем перевода биологических жидкостей в твердую фазу [9,10].

Цель исследования состояла в определении критериев диагностики респираторных и герпетических инфекций, полученных при проведении сравнительного анализа трех методов кристаллографии на модели лабораторных животных (мышей).

Материалы и методы исследования В экспериментальной работе использовали эталонный штамм вируса гриппа АPR/8/34 (H1N1), патогенный для мышей. Инфекционный титр вируса составлял 7-8 lg ЭИД50 в 0,2 мл. Также применяли эталонные штаммы ВПГ (штамм Л2) человека, полученные из института вирусологии им. Д.И.Ивановского РАМН. Инфекционный титр вируса составлял 4,5 lg ТЦП/мл. Для моделирования инфекций были сформированы следующие группы:

1 группа – для гриппозной инфекции 1.1. - контрольная группа (30 мышей массой 10-12 гр.), которым интраназально вводили физиологический раствор в объеме 0,05 мл.

WWW.MEDLINE.RU ТОМ 7, ВИРУСОЛОГИЯ, ДЕКАБРЬ 2006 Дата поступления: 11.10.2006.

1.2. – опытная группа – (30 мышей массой 10-12 гр.) заражали под эфирным наркозом интраназально по 0,05 мл аллантоисной жидкостью содержащей вирус гриппа АPR/8/34 (H1N1).

2 группа - для острой герпетической инфекции 2.1. - контрольная группа, которая состояла из 30 мышей массой 20-22 гр. Им внутрибрюшинно вводили 0,2 мл 0,9% физиологического раствора.

2.2. – опытная группа, состоящая из 30 мышей каждая массой 20-22 гр была заражена внутрибрюшинно ВПГ с инфекционным титром 4,5 lg ТЦП50/мл в объеме 0,2 мл.

У всех животных в динамике взяты пробы ротовой жидкости, мочи и крови на 2,3,5,7,10,15,25,30,45 сутки от начала заражения. Во время декапитации брали кровь. Затем эти биожидкости были исследованы методами кристаллографии (ПМ), тезиграфии (ТГ)и кристаллических налетов (КН). Приготовление препаратов производили по общепринятым методикам. Просмотр препаратов проводили в поляризационном свете при скрещенном положении поляризаторов и увеличении в 150х200, приготовленных методом тезиграфии и выветренных солей - на световом микроскопе при увеличении 60 раз. Всего 1080 исследований. Параллельно проводилось исследование РИФ в целях обнаружения вирусных антигенов гриппозной и герпетической этиологии (всего 900 исследований).

Результаты исследования I. Анализ образцов при использовании метода поляризационной микроскопии Данные кристаллографии контрольной группы* В сыворотке крови экспериментальных животных контрольной группы и опытных групп перед заражением встречались жидкокристаллические линии (ЖКЛ) в виде мелкой сети, также текстуры конфокальных доменов (КД, КТ). Наблюдался переход конфокальных доменов в сферолиты. Последние различались по размерам и формам, но представлены были в основном мелкие (СФДм). Наблюдались игольчатые кристаллы и коралловидные кристаллы, но лишь в небольших количествах.

В ротовой жидкости указанных животных отмечались жидкокристаллические линии (ЖКЛ) и миелиновые формы (МФ).





Конфокальные домены (КД) встречались в небольших количествах. Иногда они образовывали группы в виде конфокальных текстур (КТ) или маслянистых бороздок (МБ). Наблюдались аномальные морфологические связи МФ-ВТ, полигональная текстура (ПТ), морфологически связанная с МБ. Имели место разрушения КТ и конфокально-полигональных текстур (КПТ), за счет окисления, приводило к появлению специфической окраски.

При кристаллографическом изучении образцов мочи у этих мышей встречались крупные игольчатые кристаллы (2-4 в поле зрения). По краям препарата появлялись коралловидные WWW.MEDLINE.RU ТОМ 7, ВИРУСОЛОГИЯ, ДЕКАБРЬ 2006 Дата поступления: 11.10.2006.

* Примечание: данные, полученные в обеих контрольных группах, отличающихся по характеру введения контрольного материала, не имели различий между собой по текстурам. Поэтому описание полученных результатов для них обобщены.

дендриты, иногда они занимали значительную его площадь (от 3 до 25 в поле зрения).

Наблюдались пластинчатые кристаллы из мочевой кислоты разнообразной формы уратов солей натрия, калия, кальция и магния разбросанные по всей поверхности препарата. В единичных случаях попадались оксалаты кальция в виде зерен (1-3 в поле зрения). Из текстурных образований имели место сферодендриты и сферолиты небольших размеров и правильной округлой формы (1-3 в поле зрения).

Данные кристаллографии группы животных, экспериментально зараженных вирусом гриппа При изучении образцов сыворотки крови животных уже на вторые сутки после заражения выявлены следующие отличия от контрольной группы: текстуры сыворотки крови при данной инфекции характеризовались наличием небольшого числа конфокальных доменов (1-2 в поле зрения). Наблюдалось увеличение числа средних сферолитов, средних и крупных сферодендритов, коралловидных кристаллов и скелетных дендритов. При анализе частоты появления и среднего значения основных структурных признаков кристаллизации выявлены статистические значимые различия с контрольной группой по появлению средних сферодендритов ( 6 в поле зрения) в больших количествах и скелетных дендритов (1-3 в поле зрения) в небольших количествах (p0,05) (рис.1).

WWW.MEDLINE.RU ТОМ 7, ВИРУСОЛОГИЯ, ДЕКАБРЬ 2006 Дата поступления: 11.10.2006.

Рис.1. Текстурные данные сыворотки крови группы экспериментальных животных, зараженных вирусом гриппа и контрольной, по данным метода поляризационной микроскопии.

Примечание: достоверные отличия текстурных признаков между группами отмечены * ЖКЛ- жидкокристаллические линии; КД- конфокальные домены; ИК – игольчатые кристаллы; СФм- сферолиты малые; СФс –сферолиты средние; СФк –сферолиты крупные; Ко – коралловые дендриты; СФДм – сферодендриты малые; СФДс – сферодендриты средние; СФДк – сферодендриты крупные; Тд – тонкие дендриты; Дск – скелетные дендриты; ЛК – линзовидные кристаллы.

При изучении образцов ротовой жидкости не выявлено значимых отличий от контрольной группы по текстурам жидкокристаллических фаз (p0,05).

В образцах мочи было обнаружено большое количество сферолитов искаженной формы.

Если изменения формы продолжались, то по краю сферолитов образовывались множественные, глубокие складки. Отмечено появление трипельфосфатов, иногда гигантских размеров, в основном, вытянутой формы, с большим числом отростков неправильной формы.

При анализе были выявлены следующие патологические морфотипы мочи, имеющие значимые отличия от контрольной группы по текстуре жидкокристаллических фаз: появление искаженных сферолитов и трипельфосфатов крупных размеров (1-2 в поле зрения) (р0,05).

Данные кристаллографии группы животных, экспериментально зараженных ВПГ При изучении образцов сыворотки крови зараженных вирусом ВПГ животных, уже на 3 сутки после заражения выявлены следующие отличия от контрольной группы в текстуре жидкокристаллических фаз: уменьшение числа средних сферолитов (СФс, увеличение (СФДс) и крупных (СФДк), сферодендритов, а также тонких (Дт) и скелетных (Дск) дендритов.

При анализе частоты появления и среднего значения основных структурных признаков кристаллизации в сыворотке крови выявлены достоверные различия с контрольной группой по следующим структурным признакам: средним сферолитам (3-5 в поле зрения); средним и крупным сферодендритам (6 в поле зрения); тонким дендритам (1-3 в поле зрения) и скелетным дендритам (1-3 в поле зрения) (p0,05). Эти текстуры наблюдали в течение 2-4 дней во время острого инфекционного процесса (рис.2).

WWW.MEDLINE.RU ТОМ 7, ВИРУСОЛОГИЯ, ДЕКАБРЬ 2006 Дата поступления: 11.10.2006.

Рис.2. Текстурные данные сыворотки крови группы экспериментальных животных, зараженных ВПГ и контрольной группы по данным метода поляризационной микроскопии Примечание: достоверные отличия текстурных признаков между группами отмечены * ЖКЛ- жидкокристаллические линии; КД- конфокальные домены; ИК – игольчатые кристаллы; СФмсферолиты малые; СФс –сферолиты средние; СФк –сферолиты крупные; Ко – коралловые дендриты; СФДм – сферодендриты малые; СФДс – сферодендриты средние; СФДк – сферодендриты крупные; Тд – тонкие дендриты;

Дск – скелетные дендриты; ЛК – линзовидные кристаллы.

В ротовой жидкости исследуемых мышей инфицированных ВПГ практически не встречались жидкокристаллические линии (ЖКЛ), миелиновые формы (МФ). Определялись в небольших количествах конфокальные домены (КД), маслянистые бороздки (морфологический вариант КД, выстроившихся в цепочку на месте бывшей МФ), веерные текстуры (ВТ). Из аномальных морфологических связей встречались МФ-ВТ и полигональные текстуры (ПТ), в некоторых случаях связанные с маслянистыми бороздками (МБ). Были выявлены следующие значимые отличия от контрольной группы по текстурам жидкокристаллических фаз: появление массивных маслянистых бороздок -МБ ( 6 в поле зрения), веерных текстур - ВТ (3-6 в поле зрения), аномальных связей - МБ-ВТ (1-2 в поле зрения); атипичных форм (1-2 в поле зрения) (р0,05).

При изучении образцов мочи наблюдались структуры характерные, для острых патологических состояний. Нами были выявлены следующие патологические морфотипы, имеющие значимые отличия от контрольной группы в текстуре жидкокристаллических фаз:

WWW.MEDLINE.RU ТОМ 7, ВИРУСОЛОГИЯ, ДЕКАБРЬ 2006 Дата поступления: 11.10.2006.

сферолиты искаженной или гигантской формы (в поле зрения 1-2); трипельфосфаты (единичные, крупные 1-2) (p0,05).

II. Анализ образцов при использовании тезиграфического метода (CuCl2 х 2Н2О) Данные кристаллизации контрольной группы.

Макроскопически тезиграфическая картина сыворотки крови экспериментальных животных характеризовалась полупрозрачными кристаллами игольчатой формы, собранных в виде четырех пучков, исходящих из центров кристаллизации. Число центров кристаллизации колебалось от 3 до 15. В среднем 8,8±4,7. Расположение их центров на поверхности стекла было равномерным, т.е. наблюдалась их упорядоченность, отмечались звездообразные формы с симметричным расположением кристаллов. Число лучей в одном пучке - от 3 до 7 (в среднем 4,6±3,5). Пучки кристаллов были густые в центре. Они постепенно разветвлялись, истончались по периферии или даже незначительно прерывались по мере разветвления. Сами кристаллы имели, в основном, правильную геометрическую форму. Цвет кристаллов был светлым. Наблюдали незначительные поломки и перекресты лучей.

При исследовании ротовой жидкости было выявлено наличие четких кристаллических структур, которые были определенной морфологии. Морфологические структуры центральной части препаратов имели завершенный структурированный вид с четко выраженными центрами кристаллизации. Центры кристаллов располагались равномерно.

Кристаллографическая картина характеризовалась появлением на светлом фоне полупрозрачных лучей игольчатой формы, собранных в виде пучков, исходящих из центров кристаллизации. Число центров кристаллизации колебалось от 4 до 10 (в среднем 7,4±3,3).

Расположение их центров на поверхности стекла было, в основном, равномерным. Число лучей в одном пучке варьировало от 2 до 6 (в среднем 3,2±2,2). Пучки кристаллов в центре были густые. Они постепенно разветвлялись, истончались по периферии. Сами кристаллы имели правильную геометрическую форму. Кроме того, имели место первичные и вторичные кристаллизационные лучи, которых было значительно меньше. Участков свободного кристаллизационного поля было очень мало из-за густого расположения кристаллов. Как правило, в краевой зоне периферической части препарата кристаллические структуры отсутствовали. К центру начинался переходный процесс постепенного формирования кристаллических структур. В некоторых препаратах в периферической части также увеличивалась площадь краевой зоны. Имелась незначительная поломка кристаллов.

Макроскопически кристаллографическая картина мочи характеризовалась полупрозрачными кристаллами игольчатой формы, собранные в виде четырех пучков, исходящих из центров кристаллизации. Число центров кристаллизации колебалось от 4 до 10 WWW.MEDLINE.RU ТОМ 7, ВИРУСОЛОГИЯ, ДЕКАБРЬ 2006 Дата поступления: 11.10.2006.

(7,5±3,4). Расположение их центров также было равномерным. Число лучей в одном пучке - от 2 до 6 (3,2±2,4). Пучки кристаллов в центре были густыми. Они постепенно разветвлялись, истончались по периферии или даже незначительно прерывались по мере разветвления. Сами кристаллы имели правильную геометрическую форму.

Данные кристаллографии группы животных, экспериментально зараженных вирусом гриппа Макроскопическая картина кристаллограммы сыворотки крови у мышей этой группы характеризовалась незначительным увеличением количества центров кристаллизации. Этот показатель составлял 11,8±5,8. Наблюдалось увеличение числа лучей в пучке кристалла Центры и размеры кристаллов у них оказались меньше, чем у здоровых животных.

Иногда терялась их правильная геометрическая форма, появлялись вторичные и третичные лучи, увеличивалась толщина лучей. У зараженных мышей лучи кристаллов располагались довольно хаотично, перекрещивались. Встречались «поломка» лучей, а также их прерывание.

Отмечалось смещение лучей с потерей симметрии фигуры, иногда их укорочение и утолщение, особенно магистральных отрезков. На коротких и широких лучах определяли дополнительные ответвления. Указанные изменения в данной опытной группе животных были статистически не достоверны по сравнению с контрольной группой (p0,05).

При изучении образцов ротовой жидкости и мочи также не выявлено значимых отличий от контрольной группы по текстурам кристаллизации при использовании CuCl2 х 2Н2О (p0,05).

Данные кристаллографии группы животных, экспериментально зараженных ВПГ Тезиография сыворотки крови с использованием в качестве кристаллообразующего вещества CuCl2 показала определенную для экспериментальной группы животных организацию типичных кристаллических структур. Кристаллограмма характеризовалась увеличением количества центров кристаллизации. Этот показатель составлял в среднем 9,5±5,3. Центры кристаллизации располагались неравномерно, не было вторичных и третичных кристаллизационных лучей. Наблюдалось увеличение количества лучей в пучке кристалла в среднем до 5,5±3,6. В периферической части препарата в краевой зоне кристаллические структуры не выявлялись. К центру начинался переходный процесс постепенного формирования кристаллических структур. Центры и размеры кристаллов оказались меньше, чем у здоровых животных. Терялась их правильная геометрическая форма, появлялись вторичные и третичные лучи, увеличивалась их толщина. Лучи кристаллов располагались довольно хаотично, иногда перекрещиваясь; на основных лучах параллельными рядами располагались кристаллики ромбовидной формы. Встречалась «поломка» лучей и их прерывание. Появлялись воспалительные кристаллы в виде «еловых лап» и «пальмовых WWW.MEDLINE.RU ТОМ 7, ВИРУСОЛОГИЯ, ДЕКАБРЬ 2006 Дата поступления: 11.10.2006.

листьев», окраска лучей становилась серой. Наряду с указанными признаками отмечалось смещение лучей с потерей симметрии фигуры, наблюдались их укорочение и утолщение, особенно магистральных отрезков. На коротких и широких лучах определялись дополнительные ответвления. Указанные изменения хотя и наблюдались в опытной группе животных, зараженных ВПГ, но не позволяли достоверно отличать их от контрольной группы (p0,05).

При изучении образцов ротовой жидкости и мочи также не обнаружено статистически значимых различий от контрольной группы по характеру текстур кристаллизации при использовании CuCl2 х 2Н2О (p0,05).

III. Анализ образцов при использовании метода кристаллических налетов Данные кристаллографии контрольной группы В сыворотке крови экспериментальных животных при использовании в качестве кристаллообразующего вещества NaCl, кристаллические налеты состояли из отдельных правильной формы тетраэдров и четких папоротниковидных форм кристаллических структур с выраженными центрами кристаллизации. В поле зрения находились дендритные формы кристаллов в виде длинных узких образований. Кристаллические веточки находились в определенном геометрическом порядке. Кристаллические налеты характеризовались наличием кристаллов, имеющих фигурный ромбовидный центр кристаллизации с расходящимися от него лучами с отростками, состоящими из цепочек мелких кристаллов, в основном формы ромба или тетраэдра.

В ротовой жидкости кристаллические налеты состояли из отдельных правильной формы тетраэдров и четких папоротниковидных форм с выраженными центрами кристаллизации. Имело место образование дендритных форм кристаллов в виде длинных узких образований. Кристаллические веточки находились в определенном геометрическом порядке.

Кристаллические налеты характеризовались наличием кристаллов, имеющих фигурный ромбовидный центр кристаллизации и расходящиеся от него лучи с отростками, состоящими из цепочек мелких кристаллов, в основном треугольной формы.

При исследовании мочи определялись отдельные тетраэдры правильной формы и небольшое количество аморфных масс. Наблюдалось образование дендритных форм кристаллов. Кристаллические веточки находились в определенном геометрическом порядке.

Кристаллические налеты характеризовались наличием кристаллов, имеющих фигурный ромбовидный центр кристаллизации с расходящимися от него лучами и отростками, состоящими из цепочек мелких треугольных кристаллов.

В группе животных при экспериментальном заражении вирусом гриппа

WWW.MEDLINE.RU ТОМ 7, ВИРУСОЛОГИЯ, ДЕКАБРЬ 2006 Дата поступления: 11.10.2006.

При исследовании сыворотки крови кристаллические налеты состояли из правильных или искривленных форм кристаллов, а также включали аморфные массы. Изредка наблюдали дендритные кристаллы удлиненной формы в виде веточек. Также оставались ромбовидные или волнообразные центры кристаллизации. Расходящиеся от них лучи с отростками состояли из мелких треугольных кристаллов. Толщина кристаллических веточек увеличивалась в 1,5 раза по сравнению с контрольной группой. Кристаллический рисунок имел вид хаотичных и грубых нитей, и эта картина прослеживалась во всех исследуемых образцах слюны данной группы.

При изучении препаратов ротовой жидкости и мочи мышей, зараженных вирусом гриппа, также, как и в предыдущем случае, не было выявлено значимых отличий от контрольной группы по текстурам кристаллизации при использовании изотонического раствора NaCl (p0,05).

Данные кристаллографии группы животных, экспериментально зараженных ВПГ При исследовании препаратов сыворотки крови, выявлялись следующие кристаллографические формы: в поле зрения были видны, в основном, искривленные по форме кристаллы. Центры кристаллизации располагались неравномерно относительно друг друга, вокруг них просматривались очень мелкие деструктивные морфологические структуры.

На некоторых образцах имелись крупные вкрапления поваренной соли. В единичных случаях можно было заметить дендритные формы кристаллов. Кристаллические веточки находились в беспорядке. Встречались ромбовидные или волнообразные центры кристаллизации. От них расходились лучи с отростками, состоящими из цепочек мелких кристаллов треугольной формы. Толщина кристаллических веточек была большей, чем в контрольной группе.

Наблюдалась грубость кристаллического рисунка, которая прослеживалась во всех исследуемых образцах слюны данной группы. Но достоверных отличий по изменению формы и расположения кристаллов в образцах сыворотки крови при данном методе исследования, не было выявлено (p0,05).

При изучении препаратов ротовой жидкости и мочи, полученных от мышей, зараженных вирусом ВПГ, не было выявлено значимых отличий от контрольной группы по текстурам кристаллизации при использовании изотонического раствора NaCl (p0,05).

Обобщая вышесказанное, следует сказать следующее. Известно, что согласно теории формирования патологических состояний, возникающие аномальные отклонения в системе организма уменьшают его общую адаптивность и нарушают саморегуляцию обмена веществ.

Одновременно с нарушением функций возникают изменения фазового состава и происходят структурные перестройки в биологических средах организма (липидном матриксе мембран и цитоплазме клеток, интиме сосудов, в биологических жидкостях). Например, депонирование липидов в виде лиотропных и термотропных жидкокристаллических модификаций, реализуется WWW.MEDLINE.RU ТОМ 7, ВИРУСОЛОГИЯ, ДЕКАБРЬ 2006 Дата поступления: 11.10.2006.

рядом мезотропных переходов, изменяющих механические и физико-химические свойства среды - вязкость, упругость, электрическую активность и т. д.. Полученная информация о структуризации биожидкостей, при использовании нами трех методов, содержит сведения не только о концентрации элементов, но главное - она может показать характер их связей между собой. Все клетки, обладающие способностью продуцировать белковые структуры, частично используют их для своего потребления, выводят остальное в жидкие среды организма.

Патологические изменения, возникающие в организме, могут приводить к нарушению физиологического ритма химической активности его структур, что четко отражается в самой морфологической характеристике этого явления в виде перехода биологических жидкостей из жидкой фазы в твердую. Любые изменения, происходящие в живом организме, проявляются в определенном изменении архитектоники изучаемых структур при переходе их в другую фазу.

Это и позволяет обнаружить те или иные характерные текстурные черты патологического процесса. Прежде всего, это связано с тем, что сами биожидкости представляют собой многокомпонентные коллоидные системы, В полярном растворителе - воде они формируют лиотропные жидкокристаллические системы, характеризующиеся упорядочением молекулярных комплексов и проявляющиеся типичной картиной кристаллов (текстур) содержащих липиды, белки, растворы углеводов, ферменты, гормоны, витамины, вирусы, бактерии, соли и другие комплексы и системы [2, 4].

В частности, параметры текстурообразования в образцах сыворотки крови зависят от соотношения количества метаболитов, молекулы которых способны к образованию оптически активных текстур (липидные комплексы, белки, липопротеины, аминокислоты и др.) и метаболитов, подавляющих образование оптически активных текстур (минеральные соли, некоторые белки и другие вещества). Преобладание одних над другими отражается в образовании типичных (референтных) структур. Например, сыворотка крови при избытке щавелевой кислоты характеризуется наличием веерообразных дендритов. При повышении содержания креатинина – определяются друзы и дендритоподобные сферолиты. При избытке кальция появляются конфокальные домены. При увеличении концентрации холестерина – крестообразные сферолиты. Следовательно, текстурообразование в сыворотке крови отслеживает как степень изменения химизма крови, так и структуру этих изменений.

Такие же текстурные изменения можно наблюдать при кристаллизации ротовой жидкости (разбавленная система, в которой соли кристаллизуются в присутствии макромолекул муцина, амилазы и др.). Наиболее важными изменениями в белковых молекулах являются образование комплексов "окисленный липид - белок", полимеризация белковых молекул и разрушение аминокислот. Эти изменения отражаются структурами, возникающими в препаратах, которые также в сильной степени зависят от соотношения активных ионов, WWW.MEDLINE.RU ТОМ 7, ВИРУСОЛОГИЯ, ДЕКАБРЬ 2006 Дата поступления: 11.10.2006.

кислотно-щелочного баланса среды, обусловленных влиянием гормональных и стрессфакторов, присутствующих при лихорадочных состояниях и инфекционных заболеваниях.

Происходят формирование характерных текстурных комплексов и быстрое разрушение конфокальных (КТ) и конфокально-полигональных (КПТ) текстур вследствие окисления, что сопровождается появлением окраски и потерей очертаний типичных элементов текстуры при сохранении яркого свечения в поляризованном свете.

При понижении количества выделения мочи повышается ее концентрация, что нередко наблюдается в период активной инфекции. При этом в препаратах мочи определяются кристаллы, которые образуются мочевой кислотой, фосфорнокислым и сернокислым кальцием, оксалатом кальция, моногидратом холестерина, солью фосфорнокислой аммиакмагнезии. Это может быть связано с нарушением структуры биожидкости и ее агрегатного состояния в условиях высокой гетерогенности среды при инфекциях, в том числе и вирусных.

Следует учитывать, что во всем многообразии сложной иерархии гомеостатических механизмов особое значение в жизнедеятельности организма имеет постоянство состава жидкой среды организма. В этом плане первостепенную роль играет поддержание на строго определенном уровне кислотно-солевого обмена (pH крови не выходит за пределы 7,35 – 7,47) даже в экстремальных условиях, например, при диабетическом ацидозе. Казалось бы постоянство среды не должно нарушаться, но в патологический процесс включаются другие механизмы. Так, при повреждении клеток происходит нарушение проницаемости клеточных мембран и состояния протоплазмы поврежденной клетки, увеличивается проницаемость и в субклеточных структурах (митохондрии, лизосомы и до.). В этом случае освобождаются свободные аминокислоты, ферменты лизосом и митохондрий. При этом нарушается строение поверхностных протоплазматических структур и деятельность клеточных «насосов» (К+ - Na+, H+ - ОН- и др.). Нарушаются как диффузно-осмотические, так и физиологические механизмы проницаемости, работающие против осмотических сил. В частности, наличие избыточного К+ в биосреде приводит к преобладанию морфотипа миелиновых форм, а последний фактор коррелирует с состоянием вегетативной нервной системы. Происходящие изменения обмена натрия могут быть связаны с нарушением обмена веществ, среди которых можно назвать и явления лихорадки при вирусных состояниях [1] Что касается методов тезиграфии и кристаллических налетов, то при их использовании можно выявить связь между тяжестью общего состояния и характером изменения кристаллов.

Чем больше центров кристаллизации, распада кристаллов и выраженность «поломки», тем тяжелее состояние зараженного животного. Некоторыми исследователями выявлена корреляция этих изменений с давностью заболевания и глубиной метаболических расстройств, что позволяет проводить косвенное наблюдение за течением патологического процесса, WWW.MEDLINE.RU ТОМ 7, ВИРУСОЛОГИЯ, ДЕКАБРЬ 2006 Дата поступления: 11.10.2006.

основанное на том, что изменение химического состава биожидскостей оказывает различное влияние на внешний вид кристаллов хлорной меди или хлорида натрия. В частности, возникающая под влиянием биожидкости зараженного животного дендритная и сферолитная кристаллизация хлорной меди является следствием наличия примесей, которые, скапливаясь возле граней, препятствуют их росту и вызывают образование указанных структур. Эта точка зрения на механизм образования дендритов и сферолитов является преобладающей в современной теории кристаллографии [5,6].

При исследовании кристаллов хлорной меди или хлорида натрия оказалось, что в спектре кристаллов в контроле обнаруживаются только элементы меди (натрия) и хлора, тогда как при кристаллизации хлорной меди (натрия) в присутствии биожидкости зараженных животных в спектре кристаллов появляется калий. Характерно, что калий на лучах кристаллов выявляется в местах образования дендритов. В состав последних могут также входить мочевина, креатинин, магний. В контрольных образцах этих микроэлементов не находили.

Поэтому можно предположить, что калий, мочевина, креатинин активно включаются в состав кристаллов хлорной меди (натрия) в результате изоморфного его замещения или адсорбируются на их поверхности. Поэтому в присутствии этих веществ происходит образование кристаллов хлорной меди (натрия) разных размеров, изменяется их внешний вид, возникают явления дендритной и сферолитной кристаллизации. Появление кристаллов Сапирофосфат-дигидрата и апатита, Na-урата – вызывают образование кристаллов сферической, игольчатой и палочковидной формы. Кристаллические иммуноглобулины образуют прямоугольную или ромбическую форму, белки и коллаген образуют звездчатые структуры [3,8] Поэтому появление в биожидкостях избыточного количества продуктов незавершенного метаболизма, элементов деградации тканей, иммунных комплексов и других патологических образований приводит к изменению вязкости среды и создает условия для развития аномальных кристаллов. Это может быть связано с увеличением доли высокомолекулярных соединений и наличием других веществ и инородных включений, что сопровождает процесс воспаления. Это препятствует образованию типичных для данной биожидкости структур.

Подводя итог кристаллографическим исследованием в группе экспериментальных животных, проведенных нами с использованием трех методов (поляризационной микроскопии, тезиографии и кристаллических налетов), следует сказать, что только при первом были получены статистически значимые данные о диагностических критериях определения воспалительного процесса, индуцированного вирусами респираторной и герпетической группы.

Диагностическими критериями гриппозной инфекции при использовании указанного метода в WWW.MEDLINE.RU ТОМ 7, ВИРУСОЛОГИЯ, ДЕКАБРЬ 2006 Дата поступления: 11.10.2006.

сыворотке крови были средние сферодендриты и скелетные дендриты. В моче измененные сферолиты и трипельфосфаты (р0,05). Диагностическими критериями ВПГинфекции в сыворотке крови было обнаружение средних и крупных сферодентдритов, тонких и скелетных дендритов (р 0,05).В ротовой жидкости - маслянистые бороздки, веерные текстуры, аномальные связи МБ-ВТ, атипичные «веера» (р0,05). При исследовании мочи искривленные (геометрические) сферолиты, трипельфосфаты (p 0,05).

Таким образом, были сделаны следующие выводы:

1. Нарушение кристаллообразования может свидетельствовать о наличии патологических нарушений в организме, связанных с инфекционным процессом вирусной этиологии.

2. Наилучшим методом кристаллографии, позволяющим выделить достоверные критерии диагностики инфекционного воспалительного процесса, индуцируемого вирусами респираторной и герпетической группы, является метод поляризационной микроскопии.

3. Методы тезиографии и кристаллических налетов не позволяют выделить кристаллографические признаки, достоверно отличающий инфекционный процесс вирусной этиологии (респираторной и герпетической).

4. При использовании в диагностических целях метода кристаллографии необходимо анализировать как можно большее число биожидкостей, в том числе и неинвазивных.

Литература

1. Кейс Р.М., Грюнтер М., Новак И. и др. Сопоставление механизмов секреции электролитов в поджелудочной и слюнных железах /Физиология и патофизиология желудочнокишечного тракта, М,. 1989.- С.289-302.

2. Кононенко Е.В., Боровик Б.М. Методология разработки медицинских морфотестов // Известия академии наук. Сер.физическая - 1997. - №1. – С. 52-55.

3. Майстренко Е.М. Кристаллографические и кристаллоскопические исследования в комплексной диагностике и оценке результатов лечения заболеваний слюнных желез:

автореф. дис. канд. мед. Наук: 14.00.21. Пермь, 2003.- 27 с.

4. Минц Р.И., Кононенко Е.В. Мезофазы в организме человека // Архив патологии.- 1981.Т.43.- Вып.7.- С.3-12.

5. Мороз Л. А., Павлов Б.А., Кравченко Л.Ф. Кристаллографический метод исследования биологических субстратов; Метод. Рекомендации.// М,. Медицина: 1981. - 29 с.

6. Тарусинов Г.А. Кристаллографическое исследование мочи в диагностике и дифференциальной диагностике диффузных заболеваний соединительной ткани / Педиатрия.- 1994.- №1.- С.55.

WWW.MEDLINE.RU ТОМ 7, ВИРУСОЛОГИЯ, ДЕКАБРЬ 2006 Дата поступления: 11.10.2006.

7. Чашечкин Ю.Д. Природа формирования структур в неоднородных жидкостях// Морфология биологических жидкостей в диагностике и контроле эффективности лечения - сб. науч.тр.М., 2001.-С.5-7.

8. Чеботарева В.Д., Майданник В.Г., Падерно В.Н. Кристаллографический метод в диагностике заболеваний почек /Врачебное дело.- 1990.- №11.- С.70-74.

9. Шабалин В.Н.Шатохина С.Н. Аутогенные ритмы и самоорганизация биологических жидкостей // Бюл.эксп. биологии и медицины – 1996. -№10. - С.364-371.

10. Шабалин В.Н., Шатохина С.Н. Морфология биологических жидкостей в клинической лабораторной диагностике // Клин. лабораторная диагностика -2002.- №3.- С.25-32.



Похожие работы:

«ISSN 0513-1634 Бюллетень ГНБС. 2015. Вып. 115 7 ЭКОЛОГИЯ УДК 504.064.3:574 ЭКОФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НЕКОТОРЫХ ВИДОВ КУСТАРНИКОВ НИЖНЕГО ЯРУСА В УСЛОВИЯХ МИКРОКЛИМАТА ПАРКОВ ЮБК Юрий Владимирович Плугатарь, Олег Антонович Ильницкий, Максим Сергеевич Ковалев, Светлана Павловна Корсакова Никитский ботанический сад – Национальный научный центр 298648, Республика Крым, г.Ялта, пгт. Никита ilnitsky.oleg@rambler.ru Проведен анализ особенностей водного режима и засухоустойчивости десяти видов...»

«ГЛАВА 4. ГЛАВА 4. ЧИБИСОВ Сергей Михайлович, доктор меС.М. Чибисов, Г.С. Катинас, М.В. Рагульская БИОРИТМЫ И КОСМОС дицинских наук, академик Русской секции МАН, академии Естествознания, профессор кафедры общей патологии и патологической физиологии РУДН. Автор 380 публикаций по актуальным проблемам космобиосферных связей, хронобиологии и хронопатологии сердечно-сосудистой системы. Член Международной организации «Биосфера и космос» (США) и Европейского общества хронобиологов. Заместитель...»

«Профессор В.М. Инюшинны 70-жылды мерейтойына арналан Посвящается 70-летнему юбилею профессора В.М. Инюшина Материалы заседания Круглого стола «Биоплазма, геоплазма, проблемы экологической безопасности человека» кафедры физиологии человека и животных и биофизики биологического факультета имени аль-Фараби, посвящённого 70-летию со дня рождения доктора биологических наук, профессора, академика Лазерной академии России, Заслуженного изобретателя РК ИНЮШИНА ВИКТОРА МИХАЙЛОВИЧА ОРГКОМИТЕТ:...»

«Положение о кафедре «Анатомии и физиологии сельскохозяйственных животных» ФГБОУ ВПО РГАТУ разработано заведующим кафедрой, д.б.н., профессором Л.Г. Кашириной Рассмотрено на заседании кафедры «Анатомии и физиологии сельскохозяйственных животных» Протокол заседания № 1 от «28» августа 2014 г. Рассмотрено на заседании Учёного совета факультета ветеринарной медицины и биотехнологии. Протокол заседания № 1 от «4» сентября 2014 г. 1 Общие положения 1.1. Настоящее Положение о кафедре «Анатомии и...»

«ISSN 0513-1634 Бюллетень ГНБС. 2015. Вып. 115 7 ЭКОЛОГИЯ УДК 504.064.3:574 ЭКОФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НЕКОТОРЫХ ВИДОВ КУСТАРНИКОВ НИЖНЕГО ЯРУСА В УСЛОВИЯХ МИКРОКЛИМАТА ПАРКОВ ЮБК Юрий Владимирович Плугатарь, Олег Антонович Ильницкий, Максим Сергеевич Ковалев, Светлана Павловна Корсакова Никитский ботанический сад – Национальный научный центр 298648, Республика Крым, г.Ялта, пгт. Никита ilnitsky.oleg@rambler.ru Проведен анализ особенностей водного режима и засухоустойчивости десяти видов...»

«Васиnий Иванович УШЕВ ~ известньzи ~ и неизвестньzи Е. Н. Колосова Василий Иванович ПАТРУШЕВ:.,., известныи и неизвестныи Документальная повесть МАГЕЛЛАН Екатеринбург-Сургут, 200 УДК 57(092) ББК 28.0 к Научный редактор член-корр. РАН, проф. Н. Г. Смирнов Ответственный редактор к.и.н.А.Я. Труфанов Реставрация фотоматериалов М. Л. Попадкин, А. В. Попадкина Издание осуществлено на средства «Гиперборея» Колосова Е. Н. Василий Иванович Патрушев: известный и неизвестный. Документаль­ ная повесть....»

«1. Цель и задачи освоения дисциплины 1.1. Цель преподавания дисциплины – научить студентов стоматологического факультета осуществлять контроль за гармоничным развитием ребенка. А также диагностировать, лечить и предупреждать наиболее часто встречающиеся заболевания детского возраста.1.2. Задачи изучения дисциплины – научить студентов общаться со здоровым и больным ребенком и его родителями, соблюдать деонтологические нормы и принципы; получать объективные данные при физикальном обследовании...»

«Российский государственный аграрный университет – МСХА им. К.А. Тимирязева Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования Адрес: 127550, Москва, ул. Тимирязевская, 49 Телефон: (499) 976-0480; 976-2050. Факс: (499) 976-0428 E-mail: info@timacad.ru. Сайт: www.timacad.ru Ректор: Нечаев Василий Иванович Контактное лицо: Романов Дмитрий Викторович, e-mail: akabos1987@gmail.com СТРУКТУРА НАУЧНОЙ ОРГАНИЗАЦИИ Факультет агрономии и биотехнологии Кафедра генетики,...»

«1. Цель освоения дисциплины Цели дисциплины: дисциплина «Физиология растений» – одна из учебных дисциплин, составляющих основу высшего агроэкологического образования. Знание физиологии растений, умение применять ее методы к решению практических задач, изучению специальных дисциплин – необходимые условия для подготовки специалистов в высших учебных заведениях. Основная цель изучения раздела «Физиология растений» – заложить теоретические основы понимания процессов, протекающих в растительных...»

«Профессор В.М. Инюшинны 70-жылды мерейтойына арналан Посвящается 70-летнему юбилею профессора В.М. Инюшина Материалы заседания Круглого стола «Биоплазма, геоплазма, проблемы экологической безопасности человека» кафедры физиологии человека и животных и биофизики биологического факультета имени аль-Фараби, посвящённого 70-летию со дня рождения доктора биологических наук, профессора, академика Лазерной академии России, Заслуженного изобретателя РК ИНЮШИНА ВИКТОРА МИХАЙЛОВИЧА ОРГКОМИТЕТ:...»

«МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН РГП на ПХВ «ЗАПАДНО-КАЗАХСТАНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ МАРАТА ОСПАНОВА» КАФЕДРА НОРМАЛЬНАЯ ФИЗИОЛОГИЯ Силлабус Дисциплина: физиология 1 Код дисциплины: 051301 Специальность: общая медицина Объем учебных часов: 162 ч. Курс: 2 семестр изучения: 3 Актобе 2014 Н БММУ 703-06-12. Силлабус. шінші басылым. Ф ЗКГМУ 703-06-12. Силлабус. Издание третье. Общие сведения о преподавателях: Руководитель кафедры к.м.н., доцент:...»

«I. V. Glukhova ОБРАЗОВАНИЕ ЗА РУБЕЖОМ УДК 658.311.44 С. Н. Т олст ог узов Толстогузов Сергей Николаевич кандидат биологических наук, доцент кафедры анатомии и физиологии человека и животных Тюменского государственного университета, Тюмень (РФ). E-mail: tolstoguzoff@rambler.ru ОПЫТ ПРОФОРИЕНТАЦИОННОЙ РАБОТЫ ЗА РУБЕЖОМ Аннотация. Цель настоящей публикации – описание профориентационной деятельности, осуществляемой в системах школьного образования разных стран. Подобная работа в России, несмотря на...»

«ISSN 2309-6063 РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК ОТДЕЛЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК ОБЩЕСТВО ФИЗИОЛОГОВ РАСТЕНИЙ РОССИИ ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ ИНСТИТУТ ФИЗИОЛОГИИ РАСТЕНИЙ им. К. А. ТИМИРЯЗЕВА РАН БЮЛЛЕТЕНЬ ОБЩЕСТВА ФИЗИОЛОГОВ РАСТЕНИЙ РОССИИ ВЫПУСК 29 МОСКВА * 2014 УДК 581.1 Бюллетень Общества физиологов растений России. – Москва, 2014. Выпуск 29. – 76 с. Ответственный редактор чл.-корр. РАН Вл. В. Кузнецов Редакционная коллегия: к.б.н. В. Д. Цыдендамбаев, к.б.н. Н. Р....»

«Федеральное агентство по образованию Российской Федерации Саратовский государственный университет им. Н.Г. Чернышевского БЮЛЛЕТЕНЬ БОТАНИЧЕСКОГО САДА САРАТОВСКОГО ГОСУДАРСТВЕННОГО УНИВЕРСИТЕТА ВЫПУСК 6 Саратов 2007 УДК 58 ББК 28.0Я4 Б 63 Бюллетень Ботанического сада Саратовского государственного университета. – Саратов, 2007. – Вып. 6. – 160 с.: ил. В шестом выпуске «Бюллетеня Ботанического сада Саратовского государственного университета» опубликованы материалы исследований, проводимых учеными...»

«Дагестанский государственный университет Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования (ФГБОУ ВПО «ДГУ») Адрес: 367000, г. Махачкала, ул. Гаджиева, 43-а Телефон: (8722) 68-23-26. Факс: (8722) 68-23-26 E-mail: dgu@dgu.ru. Сайт: http://www.dgu.ru Ректор: Рабаданов Муртазали Хулатаевич Контактное лицо: Ашурбеков Назир Ашурбекович, e-mail: nashurb@mail.ru СТРУКТУРА НАУЧНОЙ ОРГАНИЗАЦИИ Биологический факультет Кафедра ботаники Кафедра зоологии...»

«МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН РГП на ПХВ «ЗАПАДНО-КАЗАХСТАНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ МАРАТА ОСПАНОВА» КАФЕДРА НОРМАЛЬНАЯ ФИЗИОЛОГИЯ Силлабус Дисциплина: физиология 1 Код дисциплины: 051301 Специальность: общая медицина Объем учебных часов: 162 ч. Курс: 2 семестр изучения: 3 Актобе 2014 Н БММУ 703-06-12. Силлабус. шінші басылым. Ф ЗКГМУ 703-06-12. Силлабус. Издание третье. Общие сведения о преподавателях: Руководитель кафедры к.м.н., доцент:...»

«1. Цель освоения дисциплины Цели дисциплины: дисциплина «Физиология растений» – одна из учебных дисциплин, составляющих основу высшего агроэкологического образования. Знание физиологии растений, умение применять ее методы к решению практических задач, изучению специальных дисциплин – необходимые условия для подготовки специалистов в высших учебных заведениях. Основная цель изучения раздела «Физиология растений» – заложить теоретические основы понимания процессов, протекающих в растительных...»

«WWW.MEDLINE.RU ТОМ 9, ПАТАЛОГИЧЕСКАЯ ФИЗИОЛОГИЯ, ИЮЛЬ 2008 Дата поступления: 02.07.2008 ГЕМОСТАЗ ПРИ ТРАВМЕ ПАРЕНХИМАТОЗНЫХ ОРГАНОВ Попов В.А., Бояркин М.Н. Кафедра патологической физиологии Военно-медицинской академии им. С.М. Кирова (зав. кафедрой – д.м.н., профессор В.Ю. Шанин), г. Санкт-Петербург +7 (812) 329-71-59 Санкт-Петербург, Боткинская ул., 13 Введение. Ранения и травмы паренхиматозных органов являются одним из наиболее тяжелых видов хирургической патологии как в мирное, так и в...»

«НЕГОСУДАРСТВЕННОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ «САМАРСКАЯ ГУМАНИТАРНАЯ АКАДЕМИЯ» Филиал в г. Тольятти ФИЗИОЛОГИЯ ЦЕНТРАЛЬНОЙ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ УЧЕБНО – МЕТОДИЧЕСКИЙ КОМПЛЕКС для студентов всех форм обучения специальности 030301.65 Психология Тольятти 2010 Раздел 1. ОРГАНИЗАЦИОННО-МЕТОДИЧЕСКИЙ РАЗДЕЛ 1.1 Цель и задачи курса Физиология центральной нервной системы является одной из теоретических дисциплин, дающих знания законов и принципов деятельности различных...»

«У.Д.К.:631.523 (478) РОЛЬ ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ В РАЗРАБОТКЕ СОВРЕМЕННЫХ НАПРАВЛЕНИЙ В ОБЛАСТИ СЕЛЕКЦИИ И ГЕНЕТИКИ РАСТЕНИЙ ГАЛИНА КОМАРОВА Государственный аграрный университет Молдовы Abstract. This article is presented the review of the specific scientific directions developed in Republic of Moldova for the period 1969 – 2010 years in genetics, breeding and biotechnology agricultural crops on the basis of the plant physiology and biochemistry key positions. Key words:...»







 
2016 www.nauka.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Книги, издания, публикации»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.