WWW.NAUKA.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Книги, издания, публикации
 


Pages:   || 2 |

«Р.А. Зайнулин, А.Н. Инюшкин ПРАКТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ В БИОФИЗИКЕ Утверждено Редакционно-издательским советом университета в качестве лабораторного практикума Самара Издательство «Самарский ...»

-- [ Страница 1 ] --

ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО ОБРАЗОВАНИЮ

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ

ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ

«САМАРСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ»

Кафедра физиологии человека и животных

Р.А. Зайнулин, А.Н. Инюшкин

ПРАКТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ В БИОФИЗИКЕ



Утверждено Редакционно-издательским советом университета в качестве лабораторного практикума Самара Издательство «Самарский университет»

УДК 577.3 ББК 28.9 З 17 Рецензент д-р мед. наук, проф. И.Г. Кретова Зайнулин Р.А.

З 17 Практические методы в биофизике: лабораторный практикум / Р.А. Зайнулин, А.Н. Инюшкин; Федер. агентство по образованию. – Самара: Изд-во «Самарский университет», 2006. – 36 с.

В настоящем практикуме представлены основные лабораторные работы по биофизике, направленные на выработку у студентов практических навыков биофизических исследований. В начале каждой работы имеется теоретический материал, обеспечивающий более глубокое понимание целей и задач эксперимента и выполнение необходимых вычислений. Подробное и детальное освещение технических аспектов значительно облегчает как выполнение экспериментов, так и их подготовку вспомогательным персоналом. Основной акцент сделан на том, что представленные работы не требуют наличия сложного и дорогостоящего оборудования, могут быть проведены в учебных заведениях с любым уровнем материальнотехнической оснащенности и, тем не менее, позволяют понять основные теоретические закономерности изучаемых явлений.

Практикум по биофизике предназначен для студентов медицинских университетов, биологических факультетов классических университетов, кафедр физических факультетов, специализирующихся в области биофизики, а также кафедр факультетов радиоэлектроники технических высших учебных заведений, занимающихся разработкой медико-диагностических систем.

УДК 577.3 ББК 28.9 © Самарский государственный университет, 2006 © Издательство «Самарский университет», 2006 © Зайнулин Р.А., Инюшкин А.Н., 2006

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 1.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ РАСХОДА ЭНЕРГИИ В РЕСПИРАЦИОННОМ

АППАРАТЕ (МОДИФИЦИРОВАННЫЙ МЕТОД М.Н. ШАТЕРНИКОВА)

Расход энергии организмом определяют по количеству выделившейся в процессе жизнедеятельности теплоты. При прямой калориметрии используют снабженные теплообменниками специальные камеры, куда помещают биологический объект. При этом производят замеры расхода воды, протекающей через теплообменник, а также ее температуры на входе и выходе из системы.

В физиологических и клинических исследованиях для определения расхода энергии используют сравнительно простой метод непрямой калориметрии, с помощью которого расход энергии определяют косвенным путем: по объему поглощенного кислорода. Это возможно в силу того, что основным процессом, освобождающим энергию, является процесс окисления.

Цель работы: определить объем поглощенного крысой кислорода в состоянии покоя и произвести расчет расхода энергии.

Приборы и материалы: вакуум-эксикатор, U-образный водяной манометр, термометр, весы для взвешивания животного, 10%-й раствор едкого кали, вакуумная замазка, крыса.

Ход работы:

Налить на дно эксикатора 10мл 10%-го раствора едкого кали. Положить в эксикатор фарфоровый вкладыш и посадить на вкладыш крысу. Закрыть плотно эксикатор крышкой, шлиф которой смазан вакуумной замазкой. В тубус крышки вставить стеклянную шлифованную пробку с краном, который соединен посредством резиновой трубки с водяным манометром (рис. 1). Закрыть кран эксикатора и зафиксировать уровень жидкости в коленах манометра. Через 3 мин после помещения крысы в эксикатор открыть кран. Уровень жидкости в манометре изменится вследствие падения давления в эксикаторе, обусловленного поглощением кислорода организмом крысы, а выдыхаемой углекислоты щелочью. Объем поглощенного кислорода определить по формуле:

Vk=H·C, где Н – изменение давления воздуха, мм вод. ст. (по данным манометра), С– константа эксикатора;

Vэ + Vp a T C=, PO где Vэ – объем газового пространства эксикатора, включая соединительную резиновую трубку и часть закрытого колена манометра до уровня жидкости в колене; Vp – объем 10%-ного раствора едкого кали; Т– температура в эксикаторе в градусах абсолютной шкалы ( 273 + t ); Р0 – атмосферное давление, выраженное в миллиметрах манометрической жидкости (при заполнении манометра водой - 1,033 · 104 мм вод. ст.); а – растворимость кислорода в растворе едкого кали (0,027).





Рис. 1. Респирационный аппарат: 1 – вакуум-эксикатор;

2 – водяной манометр; 3 – лабораторная крыса Найденное количество кислорода, использованного крысой за 3 мин, пересчитать на объем кислорода, использованный за сутки. Для того чтобы вычислить расход энергии в абсолютных величинах, калорический эквивалент 1л кислорода (4,8 ккал) нужно умножить на весь найденный объем кислорода.

Далее вычислить расход энергии на 1м2 поверхности тела животного, пользуясь следующей формулой:

–  –  –

где Q – поверхность тела, см2; К – константа для крысы, равная 11;

g – масса тела крысы, г.

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСНОВНОГО ОБМЕНА

ПО ТАБЛИЦАМ БЕНЕДИКТА И ОТКЛОНЕНИЯ ОСНОВНОГО ОБМЕНА

ОТ ДОЛЖНОГО УРОВНЯ ПО ФОРМУЛЕ РИДА И НОМОГРАММЕ

Цель исследования: ознакомиться с табличным методом определения основного обмена и его отклонения от должного уровня методом Рида.

Объект исследования: человек.

Оборудование и материалы: таблицы Бенедикта для расчета основного обмена, весы медицинские, номограмма Рида, сфигмоманометр, фонендоскоп, секундомер, линейка.

Ход работы:

1. Для определения основного обмена используют специальные таблицы Бенедикта, составленные с учетом роста, возраста и массы тела. Находят 2 числа: первое (X) – по массе тела (табл. 1), а второе (Y) – по росту и возрасту (табл. 2). Складывают X и Y – это и будет должный основной обмен.

2. Для определения отклонения основного обмена от должного уровня у испытуемого в состоянии мышечного и эмоционального покоя подсчитывают пульс и измеряют артериальное давление на правой руке 3 раза с промежутками 1-2 мин. Для расчета берут минимальные показатели.

Расчет степени отклонения основного обмена от должного уровня производят по формуле Рида: степень отклонения равняется 0,75(частота пульса + пульсовое давление 0,74) - 72.

Для упрощения расчетов используют номограмму Рида (рис. 2), которая позволяет быстро сопоставить частоту пульса со значением пульсового давления. Для этого находят соответствующее значение пульса на левой шкале и пульсового давления – на правой, а затем соединяют их линейкой.

Точка пересечения линейки со средней шкалой показывает величину отклонения основного обмена от должного уровня в процентах.

–  –  –

196 -- 908 839 835 812 798 785 758 200 -- -- 859 845 832 818 805 778

–  –  –

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 3. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ТЕМПЕРАТУРНОГО

КОЭФФИЦИЕНТА И ВЫЧИСЛЕНИЕ

ЭНЕРГИИ АКТИВАЦИИ СОКРАЩЕНИЯ СЕРДЦА ЛЯГУШКИ

Скорость химических реакций, лежащих в основе биологических процессов, зависит от температуры. Это обусловлено тем, что любой химический процесс осуществляется путем соударения молекул, находящихся в тепловом движении. Следовательно, чем выше температура, тем больше скорость движения молекулы и выше вероятность столкновения между отдельными молекулами.

Зависимость скорости процесса от температуры отражает формула:

–  –  –

где K – константа скорости; Z – число столкновений между молекулами;

E – энергия активации; R – газовая постоянная; T – абсолютная температура.

Энергия активации отражает уровень кинетической энергии, которого должна достигнуть часть молекул для осуществления реакции, т.е. связана с количеством активных молекул, способных вступить в реакцию.

Относительное количество активных молекул отражает величина e-E/RT в вышеприведенной формуле. Если принять численное значение газовой константы за 2, то количество активных молекул при повышении температуры на 10°С увеличится в 2 раза. Величина, показывающая, во сколько раз увеличивается количество активных молекул, а следовательно и скорость процесса при повышении температуры на 10°, называется температурным коэффициентом и обозначается символом Q10. Энергия активации биологического процесса определяется по формуле

–  –  –

где Е – энергия активации в ккал/моль; T1 и Т2 – температуры, выраженные в градусах абсолютной шкалы и отличающиеся друг от друга на 10°С (Т2 = T1 + 10); lgQ10 – десятичный логарифм температурного коэффициента.

Цель работы: определить изменение ритма сокращений сердца лягушки при различных значениях температуры и вычислить энергию его активации.

Материалы: влажные камеры, термометр, канюля Штрауба, препаровальная доска, набор препаровальных инструментов, лабораторный штатив, чашка Петри, нитки, секундомер, сосуд со снегом или льдом, сосуд с горячей водой или термостат, раствор Рингера для холоднокровных, гепарин, лягушка.

Ход работы:

Перед проведением эксперимента готовят препарат изолированного по Штраубу сердца лягушки. Лягушку вначале обездвиживают. Для этого ее либо декапитируют и разрушают спинной мозг при помощи зонда, либо, нащупав на уровне плечевого пояса небольшое углубление в позвоночном столбе, вводят в спинномозговой канал зонд сначала в каудальном, а затем ростральном направлениях. Лягушку кладут на препаровальный столик вентральной стороной вверх и фиксируют ее при помощи булавок, воткнутых в концы лапок. Маленькими ножницами делают продольный надрез кожи по средней линии в каудо-ростральном направлении и удаляют лоскуты кожи с груди и брюшка. Аналогичным образом вскрывают брюшную полость, перерезав мышцы брюшной стенки. Затем, чтобы не повредить сердце, делают косые надрезы в стороны в ростро-латеральных направлениях. Дойдя до пояса передних конечностей, перекусывают кости ножницами. Захватив большим пинцетом грудную кость и приподнимая ее вверх, осторожно подрезают маленькими ножницами подлежащие ткани, стараясь не повредить сердце. Грудную кость вместе с поясом передних конечностей удаляют. Захватив глазным пинцетом перикард, вырезают его глазными ножницами. Приподняв верхушку сердца, перерезают уздечку. При помощи глазного пинцета под дуги аорты подводят обрезки ниток и накладывают лигатуры. Концы ниток обрезают. Затем подводят еще одну нитку длиной 10-15 см и оставляют ее в расправленном состоянии.

Заполняют при помощи шприца канюлю Штрауба раствором Рингера, в который добавлено несколько капель гепарина. Канюлю при этом держат в горизонтальном положении, чтобы раствор Рингера из нее не выливался.

После этого заполненную канюлю кладут на стол. Глазным пинцетом осторожно захватывают стенку луковицы аорты и тонкими ножницами делают небольшой надрез, пока через него не начнет изливаться кровь. В образовавшееся отверстие вводят кончик канюли, держа ее вдоль продольной оси сердца. В момент систолы, когда откроется спиральный клапан, слегка подкручивая, осторожно проталкивают кончик канюли в желудочек. Появление в канюле струйки крови указывает на то, что канюля введена успешно. Слегка надавливая пальцем на противоположный конец канюли, так чтобы она не выскочила из сердца, с помощью предварительно продетой под дуги аорты нитки накладывают лигатуру на мышечный валик, образованный стенкой луковицы аорты. В момент затягивания узла концы ниток слегка подтягивают вдоль канюли в направлении от сердца, так чтобы узел был затянут в самой узкой части шейки кончика канюли. Затем накладывают второй узел. Концы ниток не обрезают. После этого под среднюю часть канюли подводят какую-либо опору, например, стенку чашки Петри, а на открытый конец кладут груз, например, большой пинцет. Канюля при этом, подобно рычагу, приподнимает сердце. При этом образуется некое подобие арки, одной дугой которой являются обе дуги аорты, другой дугой

– отходящие от сердца вены. Пропустив маленьким пинцетом сквозь эту арку нитку длиной 10-15 см, накладывают на вены лигатуру как можно дистальнее от сердца, чтобы не пережать синусный узел. Концы лигатуры не обрезают.

После всех вышеуказанных манипуляций перерезают дуги аорты и отходящие от сердца вены дистальнее лигатур и извлекают сердце, укрепленное на канюле. Нитки, отходящие от шейки канюли, закрепляют на канюле при помощи резинового колечка. При помощи другого колечка закрепляют концы ниток, завязанных вокруг вен, слегка натянув последние.

Это необходимо для того, чтобы не раздувались предсердие и венозный синус во время сокращений желудочка сердца. Сердце промывают раствором Рингера с добавлением гепарина до полного удаления сгустков крови, а затем заполняют свежим раствором Рингера. Если сердце не сокращается, слегка ослабляют натяжение ниток венозной лигатуры, закрепленных на канюле. Энергичные, ритмичные сокращения, проталкивающие жидкость в канюлю, указывают на то, что препарат готов для выполнения эксперимента.

При выполнении основной работы необходима регистрация ритма сокращений сердца при температурах, отличающихся друг от друга на 10°С.

Для этого используют влажную камеру, представляющую собой маленькую колбу Эрленмейера с широким горлом, которое закрывают пробкой с двумя отверстиями. В первое отверстие вставляют термометр, во второе – канюлю Штрауба с укрепленным на ней сердцем (рис. 3).

Рис. 3. Влажная камера: 1 – колба Эрленмейера;

2 – термометр; 3 – канюля Штрауба с укрепленным на ней сердцем Во втором случае удобно разрезать пробку поперек по линии, проходящей через центр отверстия для канюли. Канюлю зажимают между получившимися половинками пробки и вставляют в горлышко колбы таким образом, чтобы резервуар термометра находился на одном уровне с препаратом сердца. На дно камеры следует предварительно налить немного дистиллированной воды.

Спустя 5-10 минут определяют частоту сокращений сердца (уд/мин).

Повторяют замеры 2–3 раза и вычисляют среднюю величину числа сокращений в минуту. Переносят влажную камеру в сосуд с горячей водой. По достижении температуры в камере на 10°С выше комнатной определяют частоту сокращений вышеуказанным способом. Затем вынимают камеру из сосуда с горячей водой и дожидаются, пока температура в ней снова станет комнатной и восстановится исходный ритм сердечных сокращений.

Аналогичные замеры проводят, помещая камеру в сосуд со снегом или льдом и дождавшись, когда температура в ней понизится на 10°С ниже комнатной.

Для вычисления энергии активации какого-либо биологического процесса необходимо:

1. Определить его скорость при двух температурах - T1 и Т2.

2. Разделив величину скорости, полученную при Т2 на величину, полученную при T1, вычислить величину Q10.

3. Найти по таблице логарифмов lgQ10.

4. Подставить в формулу Е = 0,46T1T2lgQ10 полученное значение lgQ10 и произведение численных значений показаний температуры, выраженной в градусах абсолютной шкалы.

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 4. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ТЕМПЕРАТУРНОГО

КОЭФФИЦИЕНТА И ВЫЧИСЛЕНИЕ ЭНЕРГИИ АКТИВАЦИИ ПРОЦЕССА

АССИМИЛЯЦИИ УГЛЕКИСЛОТЫ ВЕТОЧКОЙ ЭЛОДЕИ

Изменение скорости биологических процессов при изменении температуры можно изучать на растительных объектах по количеству выделяющихся пузырьков кислорода в сосуде с водой, куда помещено растение.

Цель работы: определить количество пузырьков кислорода, выделившихся из веточки элодеи при различных значениях температуры, и на основании этого вычислить энергию активации процесса ассимиляции углекислоты Материалы и оборудование: установка для термостатирования растительных объектов, ультратермостат, емкость со льдом, термометр, стеклянная палочка, бритва, осветитель, секундомер, элодея.

–  –  –

Собирают устройство для термостатирования растительного объекта.

Оно представляет собой стеклянный цилиндрический сосуд (банка подходящего размера), закрытый пробкой с пропущенными через нее трубками (короткой и длинной, доходящей почти до дна) для свободной циркуляции воды (рис. 4).

Рис. 4. Устройство для термостатирования растительного объекта Через отверстие в центре пробки внутрь банки пропущена открытой стороной вверх стеклянная пробирка большого диаметра с водой, куда помещается растительный объект.

Теплую воду подают в наружный сосуд из ультратермостата. Ультратермостат представляет собой камеру с двойными стенками, в которую заливается вода (рис. 5).

Рис. 5. Принципиальная схема ультратермостата: 1 – камера с теплоизолирующими стенками; 2 – трубчатый электронагревательный элемент (ТЭН); 3 – реле; 4 – электроконтактный термометр;

5 – электродвигатель с мешалкой Пространство между стенками заполнено теплоизолирующим материалом. На дне ультратермостата находится трубчатый электронагревательный элемент (ТЭН). При достижении заданной температуры ТЭН отключается при помощи реле, в цепь которого включен электроконтактный термометр. Для равномерного распределения теплоты по объему воды в ультратермостате она перемешивается при помощи электродвигателя с мешалкой.

Холодную воду подают из емкости с водой с помещенными туда кубиками льда. Циркуляцию теплоносителя в системе можно обеспечить при помощи лабораторного центробежного насоса (т.н. турбинки), приводимого в действие электродвигателем (рис. 6).

Рис. 6 Лабораторный электромотор и водяная турбинка

Для проведения работы острой бритвой срезают веточку элодеи, привязывают ее ниткой к стеклянной палочке свежесрезанным кончиком кверху и помещают во внутренний сосуд устройства для термостатирования. Туда же опускают термометр. Подсчитывают количество выделившихся в минуту пузырьков кислорода при комнатной температуре. Измерения проводят трижды, вычисляют среднее арифметическое. Аналогичные манипуляции производят при температуре воды на 10°С выше и ниже комнатной. На основании полученных данных вычисляют температурный коэффициент Q10 и энергию активации биологического процесса Е по формуле, приведенной в предыдущей работе.

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 5. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ТЕМПЕРАТУРНОГО

КОЭФФИЦИЕНТА И ВЫЧИСЛЕНИЕ ЭНЕРГИИ АКТИВАЦИИ РЕАКЦИИ

РАЗЛОЖЕНИЯ ПЕРЕКИСИ ВОДОРОДА КАТАЛАЗОЙ

Каталаза широко распространена в клетках животных, растений и микроорганизмов и предназначена для разрушения токсичной перекиси водорода, образующейся в ходе различных окислительных процессов в организме.

Это фермент из группы гидропероксидаз, катализирующий окислительновосстановительную реакцию, в ходе которой из двух молекул перекиси водорода образуются две молекулы воды и одна молекула кислорода:

2H2O2 ============= 2H2O + O2.

Таким образом, о скорости данной реакции можно судить по объему выделяющегося за единицу времени кислорода.

Цель работы: определить объем кислорода, выделившегося за определенное время при разных температурах в результате разложения перекиси водорода каталазой растения, и на основании полученных данных вычислить энергию активации данного процесса.

Материалы и оборудование: прибор для определения активности каталазы, лабораторный штатив, ультратермостат, емкость со льдом, термометр, секундомер, ступка с пестиком, весы, пипетка, мензурка, длинный пинцет, растение.

Ход работы:

Прибор для определения активности каталазы состоит из делительной воронки, бюретки с делениями, стеклянного тройника с краником и реактора (рис. 7). Бюретка и делительная воронка соединены друг с другом при помощи резиновой трубки по принципу сообщающихся сосудов и функционально представляют собой миллигазометр. Реактор состоит из колбы Эрленмейера, внутрь которого помещается пластмассовый стаканчик.

Рис. 7. Прибор для определения активности каталазы:

1 – делительная воронка; 2 – бюретка; 3 – стеклянный тройник с краником;

4 – колба Эрленмейера; 5 – пластмассовый стаканчик Бюретку и делительную воронку с открытым краном закрепляют в лапках штатива и заполняют водой. Взвешивают 1–2 г растительного материала и растирают его в ступке с 0,3–0,5 г мела для создания слабощелочной среды, которая является оптимальной для проявления активности каталазы. Растертый материал переносят в мензурку, ступку ополаскивают небольшим количеством дистиллированной воды, которую также выливают в мензурку, доводят водой объем смеси до 10–15 мл. Полученную смесь переливают в реактор, осторожно с помощью длинного пинцета ставят на дно реактора пластмассовый стаканчик с 5 мл 3%-го раствора перекиси водорода. Реактор осторожно закрывают пробкой со стеклянной трубкой, которая посредством резиновой трубки сообщается с газометром. Для проверки герметичности системы закрывают краник на стеклянном тройнике и немного опускают вниз делительную воронку. Отсутствие выравнивания уровней жидкости в обоих сосудах указывает на герметичность прибора. Затем снова открывают краник, перемещением делительного цилиндра устанавливают уровень воды в бюретке на нулевой отметке, закрепляют делительный цилиндр в лапке штатива в новом положении и краник закрывают. Одновременно включают секундомер и опрокидывают стаканчик внутри реактора, после чего реактор встряхивают в течение 10 с. и ставят на стол. Через 3 мин отмечают, какое количество кислорода поступило в газометр. Секундомер при этом не выключают. Снова встряхивают реактор в течение 10 с. и по истечении 3 мин определяют, какое дополнительное количество кислорода поступило в газометр. Данные манипуляции повторяют еще три раза.

Прибор разбирают, моют, вновь собирают и определяют активность каталазы при температурах на 10°С выше и ниже комнатной. В первом случае реактор помещают в ультратермостат, во втором случае – в емкость с водой и термометром, которую, в свою очередь, ставят в емкость со льдом.

Полученные данные вносят в табл.3.

Таблица 3 Образец оформления полученных данных Объем выделившегося О2, мл № 3 6 9 12 15 п/п Материал Температура, Т мин мин мин мин мин На графике строят три кривые, отражающие динамику выделения кислорода при различных температурах. Определяют температурный коэффициент и вычисляют энергию активации процесса по аналогии с предыдущими работами.

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 6. ИССЛЕДОВАНИЕ НАБУХАНИЯ ТКАНЕЙ

ВЕСОВЫМИ МЕТОДАМИ

Под набуханием понимают поглощение жидкости гелем, в результате чего увеличиваются его масса и объем. Набухание протекает в две стадии.

На первой вокруг активных групп, расположенных на поверхности коллоидных частиц, образуются сольватные оболочки, что сопровождается выделением тепла. На второй стадии в межмицеллярные пространства проникает вода, что в ряде случаев приводит к растворению геля. Данная стадия не сопровождается заметным тепловым эффектом. Набухание приводит к изменению механических свойств гелей. В частности, по мере набухания модуль упругости набухающей ткани быстро падает.

Исследование динамики набухания показало, что на первой стадии происходит уменьшение объема набухающего геля. Такое явление получило название контракции или стрикции тканей (лат. strictio - сжатие).

Стрикция обусловлена, с одной стороны, плотным расположением сольватных оболочек вокруг мицелл геля, с другой – частичным проникновением молекул растворителя внутрь самих мицелл. Стрикция белков живой ткани, а также скорость и степень набухания зависят от множества факторов: природы и функционального состояния биоколлоидов, солевого состава и pH среды, коллоидно-осмотического давления и др.

Изучение кинетики набухания помогло глубже понять механизм взаимодействия тканевых белков с рядом патогенных факторов – аллергенами, бактериальными токсинами, вирусами и т.д.

Цель работы: определить скорость набухания различных тканей лягушки в зависимости от pH среды по изменению их массы.

Материалы и оборудование: весы торзионные, набор препаровальных инструментов, бюксы, марля, вата, раствор Рингера для холоднокровных, 0,1 н раствор НСl, 0,1 н раствор NaOH, фильтровальная бумага, лягушка.

Ход работы:

Обездвиживают лягушку. Отпрепаровывают кусочки различных тканей: кожи, икроножной мышцы, печени, головного мозга. Тщательно отмывают каждый кусочек от крови и слизи раствором Рингера для холоднокровных, осторожно подсушивают фильтровальной бумагой и готовят навески массой 100 - 200 мг. В опыт берут по три навески каждой ткани. Первую помещают в бюкс с раствором Рингера, вторую – в бюкс с раствором Рингера, в который добавлена соляная кислота (0,4 см3 0,1 н НСl на 5 см3 раствора Рингера), третью – в бюкс с раствором Рингера, в который добавлен раствор едкого натра (0,4 см3 0,1 н NaOH на 5 см3 раствора Рингера).

Каждые пять минут ткань вынимают из бюкса, осторожно подсушивают фильтровальной бумагой, взвешивают и вновь помещают в бюкс.

Опыт прекращают, когда результаты двух следующих друг за другом взвешиваний перестают различаться. Строят графическую зависимость степени набухания от времени. Проводят сравнение полученных результатов.

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 7. ОПРЕДЕЛЕНИЕ РАЗМЕРОВ МОЛЕКУЛ

ПРИ ПОМОЩИ МОНОСЛОЕВ

Молекулы поверхностно-активных веществ, находящиеся на границе разделов двух фаз, могут образовывать насыщенный адсорбционный слой.

Такой слой плотно заполнен молекулами поверхностно-активных соединений и при условии плохой их растворимости образуют хорошо сформированную пленку.

Точными экспериментами установлено, что при растекании поверхностно-активного вещества по поверхности жидкой фазы толщина образовавшейся пленки достигает некоторого определенного значения при минимальной величине поверхностного натяжения. Такая предельная величина толщины пленки соответствует длине молекулы образующего пленку поверхностно-активного вещества. Такие пленки получили название мономолекулярные слои или монослои.

Детальное изучение поверхностных явлений позволило установить связь свойств монослоев со строением молекул образующего их вещества.

Различают полярные и неполярные молекулы. У полярных молекул центры электрических зарядов не совпадают, что обусловливает наличие у них высокой диэлектрической постоянной. Вещества, состоящие из полярных молекул, хорошо растворяются в полярных растворителях, типичным представителем которых является вода. Для неполярных веществ характерна симметричная электрическая структура молекул. Такие вещества плохо растворимы в воде и хорошо – в неполярных растворителях.

Молекулы поверхностно-активных веществ имеют смешанное строение. В их состав входят одна или несколько полярных групп (аминных, гидроксильных, карбоксильных и др.) и длинная углеводородная цепочка, состоящая из неполярных групп. Поскольку полярные группы обладают выраженным сродством к воде и другим полярным растворителям, на границе двух фаз они обращены к воде, в то время как длинная углеводородная цепочка, состоящая из гидрофобных радикалов, обращена к воздуху.

Чем больше длина такой цепочки, тем меньше молекулярная концентрация вещества, при которой оно способно образовывать мономолекулярный слой. Молекулы, входящие в состав такого насыщенного мономолекулярного слоя, находятся на предельно близком расстоянии друг от друга. Поэтому сжимаемость мономолекулярной пленки крайне мала, а сопротивление сжатию (т.н. поверхностное давление) весьма значительно. Поверхностное давление определяется как разность между величиной поверхностного натяжения жидкости (например, воды) до образования на ее поверхности монослоя и величиной поверхностного натяжения, которая установится после образования монослоя.

Исследование монослоев представляет собой удобную модель биологических структур, позволяющую изучать такие процессы, как передачу нервного возбуждения, действие ферментов, локализованных в клеточных структурах и др. При этом, однако, следует учитывать, что растительная или животная клетка представляет собой целостную гетерогенную систему. Поэтому экстраполяция полученных данных должна производиться с осторожностью.

Цель работы: определить размер молекулы по площади монослоя и объему поверхностно-активного вещества, пошедшего на его образование.

Материалы и оборудование: эмалированная кювета, тальк, полоски из вощеной бумаги шириной 2 см, шприц, препаровальные иголки, микробюретка, бензол, линейка, поверхностно-активное вещество.

Ход работы:

Кювету наполняют до половины чистой дистиллированной водой. На поверхность воды кладут две бумажные полоски: первую около ближайшей к экспериментатору стенки кюветы, вторую – на расстоянии 3-5 см от первой. Края полосок предварительно загибают вверх под углом, равным углу наклона стенок кюветы. Добавляя или убавляя при помощи шприца воду в кювете, добиваются, чтобы загнутые участки бумажных полосок прилегали к стенкам без зазора и в то же время полоски имели возможность свободно скользить вдоль кюветы.

Поверхность воды между полосками припудривают тальком. Затем осторожно убирают полоску, помещенную в середине кюветы, стараясь не сдвинуть полосу талька. Около края кюветы, противоположного тому, где лежит оставшаяся полоска бумаги, ставят микробюретку, заполненную раствором поверхностно-активного вещества. Наливают из микробюретки определенное количество раствора и дают растворителю испариться. На поверхности воды при этом образуется мономолекулярная пленка поверхностно-активного вещества.

Полоску бумаги осторожно, маленькими толчками продвигают вдоль кюветы, смещая ею полоску талька. Это удобно делать при помощи двух препаровальных иголок, погруженных вертикально в воду перед полоской бумаги. В какой-то момент полоска начинает двигаться назад. Это означает, что монослой занял всю поверхность воды между полосой талька и краем кюветы. Измеряют длину монослоя сантиметровой линейкой, а шириной монослоя считают ширину кюветы. Определив площадь поверхности монослоя, вычисляют длину и поперечное сечение молекулы данного поверхностно-активного вещества.

Вычисление поперечного сечения молекулы производят по формуле:

–  –  –

где q – поперечное сечение молекулы, см2; М – молекулярный вес вещества, г; S – площадь поверхности монослоя, см2; N – число Авогадро (6.02·1023); V – объем поверхностно-активного вещества, пошедшего на образование монослоя, см3; d – плотность жидкости, г.см-3.

Длину молекулы вычисляют, пользуясь формулой:

–  –  –

где g – длина молекулы, см; V – объем поверхностно-активного вещества, пошедшего на образование монослоя, см3; S – площадь поверхности монослоя, см2.

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 8.

ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОНИЦАЕМОСТИ КОЖИ ЛЯГУШКИ

Проницаемостью называется способность клеток и тканей пропускать газы, воду и растворы различных веществ. В основе проницаемости лежит явление диффузии, которое описывается законом Фика:

–  –  –

где m – количество вещества, г; t – время, сек; D – коэффициент диффузии, см2 · сек-1; S – площадь поверхности, перпендикулярной направлению диффузии, см3; c – концентрация вещества, г.см-3; x – расстояние от исходной точки диффузии, см.

Как видно из приведенной формулы, скорость диффузии dm/dt прямо пропорциональна площади поверхности, через которую происходит диффузия, концентрационному градиенту и обратно пропорциональна расстоянию.

Для определения скорости проникновения вещества в клетку из межклеточного пространства используется формула

dm/dt = - PS (c - ct),

где P – константа проницаемости; S – площадь поверхности клетки;

c – начальная концентрация вещества; ct – концентрация вещества в момент наступления диффузионного равновесия.

Поскольку диффузия представляет собой пассивный процесс, она осуществляется в обоих направлениях, и со временем происходит выравнивание встречных диффузионных потоков. Кроме того, как явствует из вышеприведенных формул, скорость диффузии и проникновения вещества в клетку будет снижаться с уменьшением концентрационного градиента во времени.

В живых системах, которые характеризуются определенной интенсивностью обмена веществ, имеют место однонаправленные потоки, базирующиеся на механизмах активного транспорта, осуществляемого против концентрационного градиента. Кроме того, односторонняя проницаемость биологических мембран определяется:

а) физико-химической асимметрией, обусловленной многослойностью тканевых мембран,

б) способностью разных слоев в различной степени адсорбировать молекулы растворенных веществ,

в) различным сродством слоев к веществам, имеющим разную pH.

Классической моделью биологической мембраны, обладающей односторонней проницаемостью, является кожа лягушки. Она состоит из двух слоев: соединительно-тканного и эпителиального. Эпителиальный слой лучше адсорбирует молекулы таких красителей, как метиленовый синий, толуидиновый синий, тионин и др. Адсорбционная способность соединительно-тканного слоя хуже. Поэтому молекулы красителей группы тиазонов перемещаются в направлении от соединительной ткани к эпителию. Помимо этого, кожа лягушки характеризуется выраженной односторонней проницаемостью и по отношению к кислотно-щелочным индикаторам. Соединительная ткань имеет слабощелочную реакцию, а эпителиальная – кислую. Поэтому такой основной индикатор, как нейтральный красный, проникает в направлении от соединительной ткани к эпителиальной, где происходит диссоциация его молекул. Изменяя pH раствора индикатора с одной стороны кожи лягушки и солевого раствора с противоположной, можно усилить, ослабить, заблокировать одностороннее движение молекул индикатора и даже изменить его направление на диаметрально противоположное.

Цель работы: изучить проницаемость кожи лягушки для различных красителей в зависимости от точки их приложения, влияния различных химических факторов и pH.

Материалы и оборудование: физиологический раствор хлорида натрия для холоднокровных, 0,05% и 0,002% растворы метиленового синего на физиологическом растворе, 0,125% и 0,01% растворы нейтрального красного на физиологическом растворе, 1/15 М раствор двузамещенного фосфата натрия (Na2HPO4), 1/15 М раствор однозамещенного фосфата калия (KH2PO4), 2% раствор серной кислоты, набор препаровальных инструментов, стеклянные трубки различных диаметров с оплавленными концами, маленькие стеклянные стаканчики, широкие резиновые кольца или лента из тонкой резины, нитки, проволочные рамки, термостат, фотоэлектроколориметр, установка для приготовления буферных растворов, лягушка.

Ход работы:

Приготавливают препарат кожного мешка. Для этого лягушку обездвиживают, отрезают стопы на уровне предплюсны, делают кольцевые надрезы кожи на уровне головки бедренной кости и снимают “чулком” кожу с задних конечностей. Во избежание подсыхания получившиеся кожные трубки смачивают водой снаружи и физиологическим раствором изнутри. Готовят два варианта кожных мешков: в нормальном положении

– эпителием наружу и в вывернутом – эпителием внутрь. Широкой частью натягивают их на стеклянные трубки подходящего диаметра и укрепляют при помощи широкого резинового кольца или резиновой ленты и прочных ниток.

На нижний открытый конец накладывают лигатуру. С целью проверки герметичности кожные мешки заполняют физиологическим раствором. Затем физиологический раствор выливают и заменяют его 2 мл 0,05% раствора метиленового синего. Мешки погружают в стеклянные стаканчики с 5 мл физиологического раствора, так чтобы уровни жидкостей в стеклянных трубках и стаканчиках совпадали. Для того чтобы мешки не соприкасались со стенками стаканчиков, стеклянные трубки укрепляют на краях стаканчиков при помощи проволочной рамки. Стаканчики с препаратами кожных мешков темостатируют 3ч при температуре 22°С. По истечении указанного срока препараты кожных мешков удаляют, а содержимое стаканчиков колориметрируют, используя в качестве контрольного раствора 0,002% раствор метиленового синего.

Аналогичным образом исследуют проницаемость кожных мешков, предварительно обработанных в течение 30 мин:

1) дистиллированной водой;

2) 70° этиловым спиртом;

3) 0,125 М раствором хлорида калия.

Результаты опытов заносят в табл. 4.

–  –  –

Нормальный мешок Вывернутый мешок Для исследования влияния pH на одностороннюю проницаемость кожи лягушки для основного индикатора предварительно готовят буферные растворы по Серенсену. Буферные растворы по Серенсену представляют собой фосфатные смеси, приготовленные путем смешивания в различных пропорциях 1/15 М раствора двузамещенного фосфата натрия (Na2HPO4) и 1/15 М раствора однозамещенного фосфата калия (KH2PO4).

Исходные растворы готовят на дистиллированной воде, из которых удален растворенный углекислый газ, обычно присутствующий в атмосферном воздухе. Для дегазирования воды ее вакуумируют или кипятят, а затем остужают в закрытом сосуде. Смешивание растворов также производят в закрытой емкости, куда растворы поступают из бюреток, снабженных хлорокальциевыми трубками, заполненными поглотителем углекислоты (например, аскаритом). Заполнение бюреток производится путем передавливания растворов из бутылей инертным газом (азотом, аргоном). Можно передавливать растворы и атмосферным воздухом при помощи резиновой груши. Но тогда воздух должен быть предварительно пропущен через хлорокальциевую трубку или склянку Тищенко, заполненную аскаритом или гранулированной щелочью.

Варьируя соотношение исходных компонентов, получают фосфатные смеси с различным значением pH от 5,28 до 8,04 (см. табл. 5).

–  –  –

5,28 0,25 9,75 5,58 0,5 9,5 5,90 1,0 9,0 6,23 2,0 8,0 6,46 3,0 7,0 6,64 4,0 6,0 6,81 5,0 5,0 6,97 6,0 4,0 7,16 7,0 3,0 7,38 8,0 2,0 7,73 9,0 1,0 8,04 9,5 0,5 В качестве основного индикатора используют 0,125% раствор нейтрального красного на физиологическом растворе. Индикатор перед заполнением кожных мешков предварительно забуферивают фосфатной смесью из расчета 1 объем буферного раствора на 2 объема раствора индикатора. Физиологический раствор перед заполнением стаканчиков забуферивают в том же соотношении. Используют следующие сочетания pH буферных растворов для приготовления наружного раствора и раствора индикатора:

pH фосфатной смеси для наружного pH фосфатной смеси для индикатора раствора 5,28 5,28 5,28 7,73 7,73 5,28 7,73 7,73 Термостатирование кожных мешков производят, как указано выше.

Перед колориметрированием содержимое стаканчиков подкисляют одной каплей 2% раствора серной кислоты. В качестве контроля используют подкисленный 0,01% раствор нейтрального красного. Полученные данные вносят в сводную таблицу, делают выводы.

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 9.

РЕГИСТРАЦИЯ ПОТЕНЦИАЛА ФОТОСИНТЕЗА ЛИСТА РАСТЕНИЯ

И ПОТЕНЦИАЛА ПОВРЕЖДЕНИЯ РАСТИТЕЛЬНОЙ ТКАНИ

Процессы жизнедеятельности животных и растительных организмов сопровождаются возникновением биоэлектрических потенциалов. Различают собственно биоэлектрические потенциалы и окислительновосстановительные потенциалы.

Причиной возникновения собственно биоэлектрических потенциалов является неравномерное распределение ионов в разных участках клеток или тканей.

Выделяют три основных типа неравномерного распределения ионов в физико-химических системах, которые могут служить причиной возникновения разности потенциалов в биологических системах:

1. Диффузионные потенциалы, которые возникают при контакте растворов с различной подвижностью ионов растворенных веществ.

2. Мембранные потенциалы, обусловленные наличием мембраны, обладающей избирательной проницаемостью по отношению к различным ионам.

3. Фазовые потенциалы, возникающие на границе раздела двух фаз, например, на границе водного раствора электролита и неполярного растворителя, не смешивающегося с водой.

Причиной возникновения окислительно-восстановительных потенциалов является неравномерное распределение электронов между участками тканей, которые различаются интенсивностью метаболических (в основном, дыхательных и гликолитических) процессов, в результате которых происходят присоединение и отдача электронов молекулами биологического субстрата.

Цель работы: зарегистрировать зависимость потенциала фотосинтеза от времени освещения, а также потенциала повреждения от места его нанесения и времени после момента повреждения.

Приборы и материалы: чувствительный гальванометр, соединительные провода, игольчатые электроды, светонепроницаемая коробка с крышкой и прорезью в стенке, полоски черной бумаги, лампа накаливания мощностью 150 – 200 Вт, водяной светофильтр, комнатное растение.

Ход работы:

Собирают измерительную установку, состоящую из гальванометра с подсоединенными к нему через тумблер игольчатыми электродами. Рядом с комнатным растением помещают светонепроницаемую коробку. Верхушку листа растения вводят внутрь коробки через прорезь в стенке. Зазоры между листом и прорезью прикрывают полосками черной бумаги. Вводят один игольчатый электрод в ту часть листа, которая осталась снаружи коробки, а второй электрод – в часть листа, находящуюся внутри. Измеряют разность потенциалов между точками введения электродов. Перекалывая электроды, находят такие участки листа, разность потенциалов между которыми минимальна. При этом стараются излишне не травмировать лист. Плотно закрывают крышку коробки и освещают растение лампой мощностью 150 – 200 Вт. Поскольку лампы накаливания являются источником не только света, но и теплоты, а излишний перегрев растения ведет к ослаблению и даже прекращению фотосинтеза, освещение необходимо вести через водяной светофильтр. Водяной светофильтр представляет собой плоский стеклянный сосуд площадью 50 50 см с расстоянием между стенками 7–8 см. Вода, налитая внутрь этого сосуда, практически не задерживает свет, но поглощает тепло, излучаемое лампой накаливания. Освещение растения ведут в течение 30 мин. Разность потенциалов измеряют каждые 5 мин на протяжении освещения и после его прекращения до тех пор, пока результаты последовательных замеров не перестанут существенно различаться. На основании полученных данных строят график, отражающий зависимость разности потенциалов фотосинтеза от времени освещения. По оси абсцисс откладывают время, ось ординат калибруют в условных единицах – делениях шкалы гальванометра.

Для регистрации потенциала повреждения растительной ткани, вводят один игольчатый электрод в черешок листа, а через 2–3 мин, когда ослабнут последствия альтерации, выше первого электрода вводят второй. Замыкают тумблером цепь гальванометра и фиксируют его показания. Когда разность потенциалов значительно уменьшится, размыкают цепь, перекалывают первый электрод выше второго, вновь замыкают цепь и снимают показания гальванометра. Опыт повторяют несколько раз на разных частях растения, отмечая направление и величину отклонения стрелки прибора.

Полученные результаты отражают в виде графика, откалиброванного, как указано выше.

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 10. ПРИГОТОВЛЕНИЕ УЛЬТРАФИЛЬТРОВ

Ультрафильтрами называют фильтры с диаметром пор от 100 мкм до 1 мкм. Согласно классификации В.И. Товарницкого, ультрафильтры подразделяются на следующие типы:

1. Мембранные ультрафильтры, изготовленные из коллодия.

2. Мембранные ультрафильтры смешанного типа, изготовленные из коллодия с добавлением белков и липоидов.

3. Естественные биологические мембраны, как правило, животного происхождения.

4. Жесткие ультрафильтры, изготовленные из керамики, стекла или металла.

В свою очередь, ультрафильтры из коллодия подразделяются на:

а) ультрафильтры на мягкой основе, в качестве которой обычно используется плотная фильтровальная бумага;

б) ультрафильтры на твердой основе–пористой керамике или тонкоячеистой металлической сетке. Такие ультрафильтры бывают не только коллодийными, а также желатиновыми или силикагелевыми;

в) ультрафильтры, не имеющие основы. Они представляют собой тонкие пластинчатые мембраны или мешочки, изготовленные из коллодия.

Такие ультрафильтры изготавливаются также из целлофана;

Поскольку коллодий представляет собой раствор нитроцеллюлозы в спирто-эфирной смеси, меняя соотношение исходных компонентов, можно изготовить ультрафильтры различной плотности с разным диаметром пор.

Помимо этого есть вещества, способствующие увеличению или уменьшению размеров пор. К первым относятся амиловый, бутиловый и этиловый спирты, ко вторым – молочная и уксусная кислоты, этиленгликоль, скипидар, касторовое и вазелиновое масла.

Размеры частиц, проходящих через ультрафильтр, зависят от следующих основных факторов:

1) диаметра пор;

2) адсорбции коллоидных частиц на поверхности ультрафильтра, обусловленной его высокой суммарной поверхностной энергией;

3) возможности растворения фильтрующейся жидкости в веществе, из которого состоит фильтр;

4) заряда мембраны.

Вследствие последних трех факторов ультрафильтр может задерживать микрочастицы, размер которых значительно меньше диаметра пор.

Цель работы: освоить методику изготовления плотных, средних и рыхлых ультрафильтров.

Приборы и материалы: фарфоровая воронка Бюхнера с пробкой, стеклянная пипетка, 4% коллодий, этиловый спирт 96°, диэтиловый эфир, нитроцеллюлоза, дистиллированная вода, горячая вода.

Ход работы:

Для изготовления средних ультрафильтров используется 4% коллодий фабричного производства. Для изготовления плотных и рыхлых ультрафильтров готовят смеси следующего состава (табл. 6):

–  –  –

Поскольку все компоненты смеси являются чрезвычайно огнеопасными, все работы должны вестись вдали от источников открытого огня и искрящих контактов электроприборов в хорошо проветриваемом помещении.

Эфир, кроме того, обладает наркотическим действием. Поэтому работы желательно проводить в вытяжном шкафу. Готовые смеси хранят в плотно закрывающихся флаконах из темного стекла.

После того как смеси приготовлены, на дно воронки Бюхнера кладут кружок плотной фильтровальной бумаги диаметром, точно соответствующим внутреннему диаметру воронки. Это необходимо для того, чтобы фильтровальная бумага по краям не образовывала складки, в которых возможен разрыв коллодийной пленки. Фильтровальную бумагу осторожно смачивают при помощи пипетки теплой дистиллированной водой, чтобы она прилипла к перегородке внутри воронки. При этом необходимо следить за тем, чтобы на стенках воронки не было капель воды. В противном случае коллодий не налипнет на стенки воронки и последующее ультрафильтрование станет невозможным.

Слегка подогревают раствор коллодия в горячей воде (вода должна нагреваться в другом помещении!) и небольшими порциями наливают его в воронку. После добавления очередной порции, наклоняя и вращая воронку, распределяют коллодий тонким слоем по поверхности фильтровальной бумаги и подсушивают его до исчезновения запаха эфира. При этом необходимо следить, чтобы коллодий плотно прилип к стенкам воронки и пленка в последующем не отслоилась. Для приготовления рыхлого фильтра необходимо 2–3 заливки, для приготовления плотного – достаточно одной. Подсушенную до исчезновения запаха эфира воронку кладут на 20–30 мин в дистиллированную воду. Если фильтр не используется сразу, воронку хранят в чистой дистиллированной воде.

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 11.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВЕЛИЧИНЫ ПОР УЛЬТРАФИЛЬТРА

ПО СКОРОСТИ ФИЛЬТРАЦИИ ВОДЫ

Определение радиуса пор ультрафильтра при фильтрации воды производят по уравнению Пуазейля:

где r – радиус пор, см; – вязкость воды при температуре опыта, выраженная в пуазах, г см-1 сек-1; – толщина мембраны, см; D – водопроницаемость ультрафильтра, см2 сек г-1; w – объем воды в ультрафильтре, приходящийся на 1см2.

Водопроницаемость ультрафильтра определяют по формуле:

–  –  –

где Q – количество воды в см3, фильтрующееся за t с.; S – площадь поверхности ультрафильтра, см3; t – время фильтрации, сек; Дp – давление (1 дина/см2 = 0,00075 мм рт. ст.).

Давление Дp может быть создано двумя способами:



Pages:   || 2 |


Похожие работы:

«Саратовский государственный университет им. Н. Г. Чернышевского БЮЛЛЕТЕНЬ БОТАНИЧЕСКОГО САДА САРАТОВСКОГО ГОСУДАРСТВЕННОГО УНИВЕРСИТЕТА ВЫПУСК 1 САРАТОВ ИЗДАТЕЛЬСТВО САРАТОВСКОГО УНИВЕРСИТЕТА УДК 58 ББК 28.0Я4 Б63 Бюллетень Ботанического сада Саратовского государстБ63 венного университета. – Саратов : Изд-во Сарат. ун-та, 2014. – Вып. 12. – 208 с. : ил. В двенадцатом выпуске «Бюллетеня Ботанического сада Саратовского государственного университета» опубликованы материалы научных исследований,...»

«Патофизиология. Том Авторы: под ред. В.В. Новицкого, Е.Д. Гольдберга, О.И. Уразовой Библиография: Патофизиология : учебник : в 2 т. / под ред. В.В. Новицкого, Е.Д. Гольдберга, О.И. Уразовой. 4-е изд., перераб. и доп. ГЭОТАР-Медиа, 2009. Т. 1. 848 с. : ил.Аннотация: Учебник подготовлен коллективом авторов ведущими патофизиологами России и стран СНГ (Украина, Грузия). В его создании принимали участие известные педагоги представители московской, томской, казанской, харьковской и тбилисской научных...»

«Алтайский государственный университет Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования (ФГБОУ ВПО «АлтГУ») Адрес: 656049, г. Барнаул, пр. Ленина, 61 Телефон: (385-2) 66-75-84. Факс: (385-2) 66-76-26 E-mail: rector@asu.ru. Сайт: www.asu.ru Ректор: Землюков Сергей Валентинович Контактное лицо: Ваганов Алексей Владимирович, e-mail: vaganov_vav@mail.ru СТРУКТУРА НАУЧНОЙ ОРГАНИЗАЦИИ Биологический факультет Кафедра ботаники Кафедра зоологии и...»

«Yu. I. Sorokin Coral Reef ECOSYSTEMS Edited by academician B.S. SOKOLOV MOSCOW NAUKA Ю. И. Сорокин ЭКОСИСТЕМЬI коралловых рифов ый е кт Ответственн р да ор к Б.С. С КО О академи О ЛВ МОСКВА НАУКА УДК 551.351.5 и 557.4 1990. 503 с. Экосистемы коралловых рифов / Ю.И. Сорокин. М.: Наука, ISBl 5-02-003402-9 Книга содержит описание геологической истории ископаемых и геоморфологии современнъ коралло вых рифов, гидрологии и гидрохимии омывающих их вод. Описаны динамика биогеш в экосистеме рифа,...»

«Федеральное агентство по образованию Российской Федерации Саратовский государственный университет им. Н.Г. Чернышевского БЮЛЛЕТЕНЬ БОТАНИЧЕСКОГО САДА САРАТОВСКОГО ГОСУДАРСТВЕННОГО УНИВЕРСИТЕТА ВЫПУСК 6 Саратов 2007 УДК 58 ББК 28.0Я4 Б 63 Бюллетень Ботанического сада Саратовского государственного университета. – Саратов, 2007. – Вып. 6. – 160 с.: ил. В шестом выпуске «Бюллетеня Ботанического сада Саратовского государственного университета» опубликованы материалы исследований, проводимых учеными...»

«Саратовский государственный университет им. Н. Г. Чернышевского БЮЛЛЕТЕНЬ БОТАНИЧЕСКОГО САДА САРАТОВСКОГО ГОСУДАРСТВЕННОГО УНИВЕРСИТЕТА ВЫПУСК 10 Саратов Издательство Саратовского университета УДК 58 ББК 28.0Я43 Б63 Бюллетень Ботанического сада Саратовского государственного университета. – Саратов : Изд-во Сарат. ун-та, 2012. – Б63 Вып. 10. – 244 с. : ил. В 10-м выпуске «Бюллетеня Ботанического сада Саратовского государственного университета» опубликованы материалы научных исследований,...»

«МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФГБОУ ВПО «КУБАНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ АГРАРНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» Факультет защиты растений Кафедра физиологии и биохимии растений ОРГАНИЗАЦИЯ УЧЕБНОЙ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ В ВУЗЕ И МЕТОДИКА ПРЕПОДАВАНИЯ В ВЫСШЕЙ ШКОЛЕ Курс лекций По направлениям подготовки 04.06.01– Химические науки; 05.06.01 – Науки о земле; 06.06.01– Биологические науки; 08.06.01 Техника и технология строительства; 09.06.01 Информатика и вычислительная техника; 14.06.01 – Ядерная,...»

«ФИЗИОЛОГИЯ И БИОХИМИЯ РАСТЕНИЙ краткий курс лекций Лекция 1. ФИЗИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ – НАУКА. Физиология растений наука об организации и координации 1.1. функциональных систем зеленого растения. Физиология растений – наука, которая изучает закономерности жизненных процессов (фотосинтез, дыхание, минеральное и водное питание, рост и развитие и др.), их сущность и взаимосвязь с окружающими условиями. Физиология растений относится к биологическим наукам, в самостоятельную науку она выделилась в XIX в....»

«ІІ глава. От «всезнания» физиологического очерка к «незнанию» полифонии. В этой главе, по мере сил, нам предстоит разобраться в двух сложных проблемах, которые выходят за рамки ХІХ века, но одно из своих ярких проявлений находят именно здесь: знающее «видение очевидного» физиологического очерка и не знающая, разомкнутая в бесконечность сложность полифонии. Два полюса познания Нового времени: «поглощение бытия мыслью», всезнающий разум — возникновение идеологии1 («знании о всяком знании» —...»

«Тематика занятий по акушерству и гинекологии для студентов 6 курса ФИУ 2015-2016 учебный год 1. Беременность физиологическая.2. Роды физиологические.3. Риск беременности и родов при заболеваниях сердечно-сосудистой системы, эндокринной патологии, болезнях крови.4. Риск беременности и родов при острых и хронических заболеваниях печени, при заболеваниях почек и мочевыводящих путей.5. Риск беременности и родов при патологии дыхательной системы, зрения, центральной и вегетативной нервной системы....»

«Положение о кафедре «Анатомии и физиологии сельскохозяйственных животных» ФГБОУ ВПО РГАТУ разработано заведующим кафедрой, д.б.н., профессором Л.Г. Кашириной Рассмотрено на заседании кафедры «Анатомии и физиологии сельскохозяйственных животных» Протокол заседания № 1 от «28» августа 2014 г. Рассмотрено на заседании Учёного совета факультета ветеринарной медицины и биотехнологии. Протокол заседания № 1 от «4» сентября 2014 г. 1 Общие положения 1.1. Настоящее Положение о кафедре «Анатомии и...»

«Концептуальные подходы к развитию инклюзивного образования в Республике Казахстан Содержание Введение 1.Анализ текущей ситуации.2.Стратегические направления концептуальных подходов к развитию инклюзивного образования.3. Механизмы реализации концептуальных подходовк развитию инклюзивного образования.4.Ожидаемые результаты и этапы реализации концептуальных подходов. Введение Концепция по вхождению Казахстана в число 30-ти самых развитых государств мира, разработана в целях реализации Послания...»

«МГУ им. М.В. Ломоносова факультет психологии кафедра психофизиологии Реферат по философии Линия Декарта и линия Спинозы в науках о психике: конфликт или взаимодействие Выполнил: Лапшина Татьяна Николаевна, аспирант очного отделения. Москва, 2004 год. Оглавление ЛИНИЯ ДЕКАРТА И ЛИНИЯ СПИНОЗЫ В НАУКАХ О ПСИХИКЕ: КОНФЛИКТ ИЛИ ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ Оглавление Введение 4 Глава 1. Основные идеи Р. Декарта (1569-1650) применительно к психологии 7 §1. Основы мировоззрения Нового времени 7 §2. «Арифметический...»

«WWW.MEDLINE.RU ТОМ 9, ПАТАЛОГИЧЕСКАЯ ФИЗИОЛОГИЯ, ИЮЛЬ 2008 Дата поступления: 02.07.2008 ГЕМОСТАЗ ПРИ ТРАВМЕ ПАРЕНХИМАТОЗНЫХ ОРГАНОВ Попов В.А., Бояркин М.Н. Кафедра патологической физиологии Военно-медицинской академии им. С.М. Кирова (зав. кафедрой – д.м.н., профессор В.Ю. Шанин), г. Санкт-Петербург +7 (812) 329-71-59 Санкт-Петербург, Боткинская ул., 13 Введение. Ранения и травмы паренхиматозных органов являются одним из наиболее тяжелых видов хирургической патологии как в мирное, так и в...»

«УДК 631:635.64 СЕКРИЕР СЕРГЕЙ УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ОСНОВНЫХ АГРОТЕХНИЧЕСКИХ ЭЛЕМЕНТОВ ТЕХНОЛОГИИ ВОЗДЕЛЫВАНИЯ ПЕРЦА СЛАДКОГО В РЕСПУБЛИКЕ МОЛДОВА 411.05 Овощеводство Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора сельскохозяйственных наук Кишинев, 2015 Работа выполнена в лаборатории орошаемого земледелия Приднестровского научноисследовательского института сельского хозяйства Научный руководитель:...»

«К ВОПРОСУ О МЕЖПОЛУШАРНЫХ ОТНОШЕНИЯХ ПРИ ОБУЧЕНИИ И НАЛИЧИИ НАВЫКА К.б.н. А. Р. Агабабян, к.б.н. А. Н. Аракелян, доцент К. Г. Даниелян Кафедра физиологии и спортивной медицины Ключевые слова: мозг, полушария, асимметрия, вызванная активность, обучение, навык. Актуальность. Функциональная асимметрия больших полушарий играет существенную роль в адаптации человека к различным видам деятельности, в том числе и к тем, которые связаны с обучением и профессиональным использованием современной техники....»

«ISSN 0513-1634 Бюллетень ГНБС. 2015. Вып. 115 7 ЭКОЛОГИЯ УДК 504.064.3:574 ЭКОФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НЕКОТОРЫХ ВИДОВ КУСТАРНИКОВ НИЖНЕГО ЯРУСА В УСЛОВИЯХ МИКРОКЛИМАТА ПАРКОВ ЮБК Юрий Владимирович Плугатарь, Олег Антонович Ильницкий, Максим Сергеевич Ковалев, Светлана Павловна Корсакова Никитский ботанический сад – Национальный научный центр 298648, Республика Крым, г.Ялта, пгт. Никита ilnitsky.oleg@rambler.ru Проведен анализ особенностей водного режима и засухоустойчивости десяти видов...»

«1. Цель освоения дисциплины Цели дисциплины: дисциплина «Физиология растений» – одна из учебных дисциплин, составляющих основу высшего агроэкологического образования. Знание физиологии растений, умение применять ее методы к решению практических задач, изучению специальных дисциплин – необходимые условия для подготовки специалистов в высших учебных заведениях. Основная цель изучения раздела «Физиология растений» – заложить теоретические основы понимания процессов, протекающих в растительных...»

«I. V. Glukhova ОБРАЗОВАНИЕ ЗА РУБЕЖОМ УДК 658.311.44 С. Н. Т олст ог узов Толстогузов Сергей Николаевич кандидат биологических наук, доцент кафедры анатомии и физиологии человека и животных Тюменского государственного университета, Тюмень (РФ). E-mail: tolstoguzoff@rambler.ru ОПЫТ ПРОФОРИЕНТАЦИОННОЙ РАБОТЫ ЗА РУБЕЖОМ Аннотация. Цель настоящей публикации – описание профориентационной деятельности, осуществляемой в системах школьного образования разных стран. Подобная работа в России, несмотря на...»

«ГЛАВА 4. ГЛАВА 4. ЧИБИСОВ Сергей Михайлович, доктор меС.М. Чибисов, Г.С. Катинас, М.В. Рагульская БИОРИТМЫ И КОСМОС дицинских наук, академик Русской секции МАН, академии Естествознания, профессор кафедры общей патологии и патологической физиологии РУДН. Автор 380 публикаций по актуальным проблемам космобиосферных связей, хронобиологии и хронопатологии сердечно-сосудистой системы. Член Международной организации «Биосфера и космос» (США) и Европейского общества хронобиологов. Заместитель...»







 
2016 www.nauka.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Книги, издания, публикации»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.